Analys av N-glykosyleringssajter är avgörande för att förstå funktionerna hos glykaner. Yaohai Bio-Pharma använder vätskekromatografi-masspektrometri (LC-MS) efter enzymatisk avkoppning för N-glykosyleringssajter.
Vi har varit inblandade i Proteinstrukturell karaktärisering av olika stora molekyler, inklusive Recombinant Subunit Vaccines, Nanokroppar/VHHs/En-domänantikroppar (sdAbs), Antikroppsfragment, Hormoner/Peptider, Cytokiner, Växtfaktorer (GF), Enzymer, Kollagener mm.
Reglerkrav för N-glykosyleringssajt
Enligt ICH Q6B-riktlinje, ”för glykoproteiner bestäms sockerinnehållet (neutrala socker, aminosocker och sialinsyra). Dessutom analyseras strukturen på sockerkedjorna, oligosackaridmönstret (antennär profil) och glykosyleringssajten (na) på polypeptidskedjan så långt som möjligt.
Analytisk metod
Analys |
Metoder |
N-glykosyleringssida |
Vätskechromatografi-Masspektrometri (LC-MS) efter enzymatisk avbrytning |
Procedurer
1. Enzymatisk spaltning av proteinet med trypsine eller annan proteas
2. Separera fragmentglykopetider
3. Bekräfta N-glykosyleringsplatsen med LC-MS
4. Analysera data