Deamidation av glutamin och asparagin sidakedjor är en vanlig modification när det gäller påverkan på egenskaperna hos proteina baserade biomediciner. Deamidation kan inträffa i glutamin rester, men vanligen med mycket lägre hastighet. Deamidationshastigheterna påverkas av temperatur, pH, lokal proteinstruktur och flankeraende aminosyrorester.
Yaohai BioPharma erbjuder tester för amino syror deamidation, vilket låter dig upptäcka amino syror deamidation genom Vätskekromatografi-Masspektrometri (LC-MS).
Vi har varit inblandade i Protein Strukturell Karaktärisering av olika stora molekyler, inklusive Recombinant Subunit Vacciner, Nanokroppar/VHHs/Single-domain Antibodies (sdAbs), Antibody Fragment, Hormoner/Peptider, Cytokiner, Växtfaktorer (CF), Enzymer, Kollagen, etc.
Reglerkraven för Amino Syror Deamidation
Enligt ICH Q6B-riktlinjerna kan deamiderade former upptäckas och karakteriseras med kromatografiska, elektroforesbaserade och/eller andra relevanta analytiska metoder.
Analytiska Metoder
| Analys |
Metoder |
| Deamidation |
Vätskechromatografi-Masspektrometri (LC-MS) |
Procedurer
t.ex., asparatdeamidering
1. Enzymatisk spaltning
2. LC-MS under High-Performance Liquid Chromatography (HPLC)-villkor
3. Dataanalys
Asparagins deamidering sker via en succinimidintermediär (Suc), som är känslig för racemisering och hydrolysering, vilket ger upphov till fyra Asp-isomerer, inklusive L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp och D-IsoAsp.
Teoretiskt sett skulle Gln-deamidering kunna generera fyra motsvarande Glu-isomerer genom en process liknande Asn-deamidering.
Den högupplösningsmassaspektrometrin identifierar enkelt den 1-Da-massskillnaden mellan peptider som innehåller Asn/Gln och deras motsvarande deamidierade motpar Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
