Disulfidbindningar kallas ibland S-S-bindningar eller disulfidbroar. Disulfidbroar påverkar biologiska verkan hos biologiska läkemedel, såsom peptider, proteiner och antikroppar.
Yaohai Bio-Pharma erbjuder analystjänster för disulfidbindningar huvudsakligen baserade på Vätskechromatografi-Masspektrometri (LC-MS).
Vi har varit inblandade i Proteinstrukturell karaktärisering av olika stora molekyler, inklusive Recombinant Subunit Vaccines, Nanokroppar/VHHs/En-domänantikroppar (sdAbs), Antikroppsfragment, Hormoner/Peptider, Cytokiner, Växtfaktorer (GF), Enzymer, Kollagener mm.
Reglerkrav för disulfidbindningar
Det finns olika antal och former av disulfidbroar i olika biologiska läkemedel, vilket bör utvärderas fullt under proteincharakteriseringstudier om det förväntade primära aminosyrföljdssequensen för produkten innehåller aminosyran cystein. Detta krävs också från reglerdokumentet ICH Topic Q6B.
Analytiska Metoder
Analys |
Metoder |
Disulfidbindningar |
Vätskechromatografi-Masspektrometri (LC-MS) efter digestion |
För nödvändiga data för en fullständig utvärdering av disulfidbronor och fria tioleler utför forskare från Yaohai Bio-pharma peptidkartläggning efter digestion med en specifik proteas. Därefter analyserar man med hjälp av on-line LC/Electrospray Ionizationsmasspektrometri (ES-MS) och/eller LC/ES-MS/MS innan och efter reduktion.
Yaohai Bio-pharma kan också genomföra Ellmans test, som är en viktig del av varje fullständig utvärdering av cysteininhållande produkter. Inom Ellmans test derivatiserar vi sulfhydryler med (5,5’-dithio-bis-[2-nitrobenzoic acid]). För att bestämma nivåerna av fria tioleler analyseras det resulterande produkten med UV-spektrofotometri vid 412nm.