Alla kategorier
Disulfidbindningar

Analys av disulfidbindningar

Disulfidbindningar kallas ibland S-S-bindningar eller disulfidbroar. Disulfidbroar påverkar biologiska verkan hos biologiska läkemedel, såsom peptider, proteiner och antikroppar.

Yaohai Bio-Pharma erbjuder analystjänster för disulfidbindningar huvudsakligen baserade på Vätskechromatografi-Masspektrometri (LC-MS).

Vi har varit inblandade i Proteinstrukturell karaktärisering av olika stora molekyler, inklusive Recombinant Subunit Vaccines, Nanokroppar/VHHs/En-domänantikroppar (sdAbs), Antikroppsfragment, Hormoner/Peptider, Cytokiner, Växtfaktorer (GF), Enzymer, Kollagener mm.

Reglerkrav för disulfidbindningar

Det finns olika antal och former av disulfidbroar i olika biologiska läkemedel, vilket bör utvärderas fullt under proteincharakteriseringstudier om det förväntade primära aminosyrföljdssequensen för produkten innehåller aminosyran cystein. Detta krävs också från reglerdokumentet ICH Topic Q6B.

Analytiska Metoder
Analys Metoder
Disulfidbindningar Vätskechromatografi-Masspektrometri (LC-MS) efter digestion

För nödvändiga data för en fullständig utvärdering av disulfidbronor och fria tioleler utför forskare från Yaohai Bio-pharma peptidkartläggning efter digestion med en specifik proteas. Därefter analyserar man med hjälp av on-line LC/Electrospray Ionizationsmasspektrometri (ES-MS) och/eller LC/ES-MS/MS innan och efter reduktion.

Yaohai Bio-pharma kan också genomföra Ellmans test, som är en viktig del av varje fullständig utvärdering av cysteininhållande produkter. Inom Ellmans test derivatiserar vi sulfhydryler med (5,5’-dithio-bis-[2-nitrobenzoic acid]). För att bestämma nivåerna av fria tioleler analyseras det resulterande produkten med UV-spektrofotometri vid 412nm.

Få en gratis offert

Get in touch