Anpassad saRNA-syntes
Selvförstärkande mRNA (saRNA), även känd som replicon RNA, kodar för in vitro-transkription (IVT) mRNA-sekvenser och virusreplicase-gener som härstammar från alphavirus eller flavivirus. Virusreplicase-gener möjliggör den självständiga förstärkningen av mRNA, vilket leder till ökad proteinetablering och en minimerad kravdosa på RNA i jämförelse med icke-förstärkande mRNAs. En annan aspekt är att saRNA är en relativt stor molekyl (mer än 14 kb).
Yaohai Bio-Pharma har etablerat en serie mRNA-syntestechniker för att erbjuda icke-förstärkande mRNA och selvförstärkande mRNA (1000 nt~14000 nt), såsom sekvensdesign och optimering, IVT, reningsprocesser, lyofilisering och lipidnanopartikel (LNP)-inkapsling. Alla produkter släpps under strikta kvalitetskontrollstandarder.
Fig. 1 Strukturella Egenskaper hos IVT mRNA: Konventionell, Cirkulär och Self-amplifying mRNA.
Sekvensegenskaper hos Self-amplifying mRNA
Den self-amplifying RNA består av fyra icke-strukturella proteiner (benämnda som nsP1, nsP2, nsP3 och nsP4), vilka härstammar från alphavirus, Venezuelan equine encephalitis virus (VEEV). Bland dessa utövar nsP1 två enzymatiska aktiviteter, nämligen GTase och N7MTase, medan nsP2 besitter RTPase-aktivitet, som är avgörande för att kapsla IVT mRNA och generera Cap 0-struktur. Dessutom fungerar nsP2 som en proteas och helicas, vilket underlätter den komplexa bearbetningen av hela nsP-komplexet. Den exakta funktionen av nsP3 är fortfarande oklar, men det interagerar med olika värdcellsproteiner, därmed bidragande till att mildra den antivirala responsen som upprättas av värdet.
En alphavirus subgenomisk promotor (SGP)-region finns placerad före det intressanta genet (GOI). SGP-elementet möjliggör starten av GOI-transkription genom att hoppa över läsningen av sekvensen som kodar för virusnsP-proteiner.
Fig. 2 Syntes och cellassay av eGFP saRNA från Yaohai Bio-Pharma RNASci Platform.
Skräddarsydda lösningar av saRNA
Syntesprotokollet för saRNA liknar mRNA: Anpassad mRNA-syntes
- Sekvensdesign
- Plasmidmall förberedelse
- in vitro transkription (IVT)
- mRNA enzymatisk kapning
- mRNA Ko-transkriptionskapning
- mRNA-rengöring
- mRNA lyofilisering
- LNP inkapsling
- Analys och testning
SV
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
