Enligt den centrala dogmen är budbärar-RNA (mRNA) bryggan för överföring av genetiskt material från DNA till proteiner.
mRNA spelar en biologisk roll genom att koda för proteiner in vivo, och moget mRNA i eukaryota organismer består av fem komponenter: 5' Cap (cap struktur), 5' UTR (icke-kodande region), ORF (öppen läsram), 3' UTR och 3' polyA-svans (polyadenylatsvans).
Tjänster detaljer
| Behandla |
Valfri tjänst |
Service detaljer |
Leveransperiod (dag) |
| mRNA-sekvensdesign och optimering |
Design och optimering av kodningssekvenser |
CDS-sekvensinriktning
CDS kodonoptimering
|
1 |
| Design och optimering av icke-kodande sekvenser |
5' UTR-sekvensdesign och optimering
3' UTR-sekvensdesign och optimering
polyA sekvensdesign och optimering
|
1-2 |
Anpassningsbara alternativ
| 5' UTR/3' UTR |
- Natur UTR-sekvens
- Mutant/Engineered UTR-sekvens
|
| 3' PolyA Tail |
- 100A ~120A Tail (rekommenderas)
- Segmenterad polyA svans
- Annan Custom tail
|
Gemensamma strategier för mRNA-sekvensdesign
| mRNA-komponenter |
Biologiska funktioner |
Optimeringsstrategier |
| 5' Cap |
Skydda mRNA från nedbrytning av exonukleaser och agera i samverkan med polyA-svansen vid 3'-änden, polyA-bindande protein och translationsinitieringsfaktorprotein för att initiera proteintranslation. |
Den naturliga Cap1-strukturen undviker receptorer för mönsterigenkänning och minskar därmed det naturliga immunsvaret, vilket kan uppnås genom ettstegs co-transkriptionellt lock eller tvåstegs enzymatiskt lock [se mRNA enzymatisk kapning och co-transkriptionell kapning för detaljer]. |
| 5' UTR |
5' UTR kan kännas igen av ribosomer, reglera translationen av mRNA och påverka stabiliteten av mRNA. |
Innehåller Kozak-sekvenser utan en mycket stabil sekundär struktur. Naturliga UTR av högt uttryckta gener är föredragna för in vitro transkription (IVT) mRNA såsom a-globin och β-globin. |
| CDS |
Proteinkodande regioner och kodande sekvenser för antigener, antikroppar eller andra funktionella proteiner. |
Kodonoptimering ökar translationsnivån, och noterar att vissa icke-optimala kodon kan spela en roll vid proteinveckning. |
| 3' UTR |
Reglera mRNA-translation och stabilitet. |
Naturliga UTR av högt uttryckta gener föredras för IVT-mRNA såsom a-globin och β-globin. |
| 3' polyA svans |
Reglera proteinuttryck och skydda lockstrukturen från nedbrytning. |
Tillräcklig längd (100-150 bp) krävs; kodande polyA-svans på transkriptionsmallplasmiden säkerställer en mer definierad polyA-svanslängd. |
Våra funktioner
- Diversifierat UTR-källaval
Flera källor till högt uttryckta naturliga & modifierade UTR-bibliotek; mogen UTR modifieringsstrategi;
- Banbrytande CDS-optimeringsteam
Samarbeta med ett professionellt AI-algoritmteam för att slutföra optimeringen av kodoner.
- Jämn polyA svansfördelning
Lägg till polyA-sekvenser enligt DNA-mallar för att kontrollera mRNA-längden mer exakt.
- Diversifierade optimeringskombinationer
Uppnå effektivt uttryck av mRNA med låg immunogenicitet.
Fallstudie
Sekvensdesign av ett mRNA för dubbelreporter: mCherry-eGFP mRNA
Yaohai Bio-Pharmas mRNA-tjänst fortsätter att uppgraderas med design och optimering av en dubbelreportergen-tandemsekvens, som uppnår samuttryck av dubbla gener.
Med hjälp av ett konventionellt transfektionsreagens transfekteras den dubbla gen-tandemsekvensen mCherry-eGFP-mRNA in i 293T-celler, och två fluorescerande signaler av mCherry (röd) och förstärkt grönt fluorescerande protein (eGFP) detekteras med samtidig uttryck efter 48 timmar, och de staplas grafen är markerad i gult.
Uttryck av mCherry-eGFP mRNA i 293T-cell
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEJ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
