Grunden för inkapsling är design och utveckling av leveranssystemet. Ett väldesignat leveranssystem tillåter cirRNA-molekyler att komma in i kroppen utan att brytas ned av RNA-enzymer och sedan effektivt levereras till målplatsen, passera cellmembranet och frisättas intracellulärt.
Lipidnanopartiklar (LNP) är det bästa leveranssystemet som finns tillgängligt, med fördelar i inkapsling, uttryck in vivo och säkerhet in vivo jämfört med andra leveranssystem. LNP med nukleinsyrafragment sväljs lätt in i celler och bildar intracellulära kroppar. När den väl kommer in i cellen protonerar den sura miljön i den intracellulära kroppen och laddar positivt huvudet av den joniserade lipiden, och smälter således samman med det inre membranet av den intracellulära kroppen och frigör målnukleinsyran i cellen för verkan.
Yaohai Bio-Pharma circRNA-tjänsten fortsätter att förbättras och kan tillhandahålla circRNA-LNP-inkapslingstjänst för att optimera relevanta kritiska processparametrar och förbättra konsistensen och reproducerbarheten av circRNA-läkemedelsproduktionen.
Behandla | Service detaljer | Leveransperiod (dag) | Deliverables |
circRNA-LNP-inkapsling | Material och flytande förbehandling | 2 | circRNA-LNP läkemedelsprodukt (DP) |
Blandning av mikroflödesanordningar | |||
Tangentiell flödesfiltrering | 1 | ||
Steriliserande filtrering | |||
circRNA-LNP kvalitetskontroll | Inkapslingseffektivitet | 1 | Testrapport rapport~~POS=HEADCOMP |
Partikelstorlek och polydispersitetsindex | |||
Zeta potential |
Snabb syntes, hög FoU-effektivitet och föroptimerade lösningar;
Inkapslingsförhållandet kan nå mer än 90%;
Storleken på lipidnanopartiklar kan kontrolleras genom att ändra vätskeinjektionshastigheten och förhållandet;
circRNA-LNP-produkter valideras genom cellexpression in vitro och kan uttrycka målproteinet effektivt.
LNP-eGFP circRNA-prover prepareras och de olika doserna av dem (1 ug, 2 ug och 4 ug) transfekteras direkt in i 293T-celler för att verifiera om de kan uttrycka målproteinet. Efter 48 timmars transfektion kan en tydlig fluorescerande signal observeras och det finns en dosökningseffekt av fluorescensintensiteten.
Lipo-circ_eGFP, som består av liposom och oinkapslat eGFP circRNA tas som en kontroll.