Plasmid DNA, som in vitro transkriptions (IVT) mall är en viktig råmaterial för mRNA-produktion. Hög utbyte, hög renhet och hög återvinning av plasmid DNA är det viktigaste mål under plasmidprocessutvecklingen.
Yaohai Bio-Pharma erbjuder en total lösning för plasmidutveckling, inklusive ovanströms (fermentering), nedströms (renings) processutveckling, processkaraktärisering och processvalidering. Vi har omfattande erfarenhet av att förbättra plasmidutbytet och isolera det från komplexa matriser genom att utveckla och optimera fermenterings-, renings- och fjärilsmaterialsborttagningsprocesser.
Den grundläggande bioprocessen för plasmidproduktion omfattar: Escherichia coli (E. coli) fermentering, cellskörning och alkalisk lysning, klarifiering, koncentration, trestegschromatografisk process (fangst, mellanrensning och polering), och koncentration.
Tjänstdetaljer | Enhetshandlingar | Parametrar |
E. coli färdes |
Skakflaska | Mediecompositioner, antibiotika, inkokningsvolym, växttemperatur och annat. |
Fermorator (7 L) |
Antibiotika, inkokningsvolym, växttemperatur, pH, upplösta syret (DO), matningsläge (t.ex., fed-batch), matsedel, fermations tid och annat. |
|
Cellskörde | Mikrofiltrering | Standard E. coli skördesprocess |
Celllysys | Cellupplösning, alkalisk lysning, neutralisering | Alkali förhållande, lystid |
Klarhet | Filtrering | Råfiltrering, 20 µm och en 5 µm filtreringskedja (föredragsvärd) |
Koncentration | Ultrafiltrering, tangentialflödesfiltrering | Porrstorlek (eller NMWC), Transmembrantryck (TMP), Flux, filtratvolym till membranarea-forhållande |
Tre-stegs kromatografi | Storleksexklusionskromatografi (SEC) eller gelfiltreringskromatografi (GFC) | Kolumnlängd och diameter, puffarssammansättning, injektionsvolym, mobil fas sammansättning (adsorption och desorption), pH, flöde, jämvikts-, bindnings-, tvätt- och elutionsvillkor. |
Affinitetskromatografi (AF) | ||
Anionbytekromatografi (AEX) | ||
Koncentration | Ultrafiltrering, tangentialflödesfiltrering | Porrstorlek (eller NMWC), Transmembrantryck (TMP), Flux, filtratvolym till membranarea-forhållande |
Flera Biologiska Reningsprocesslösningar |