alla kategorier
Tag-free Protein Preparation

Tag-free Protein Preparation

Hem >  Mikrobiell CDMO  >  Forskning och upptäckt  >  Tag-free Protein Preparation

Tag-free Protein Preparation

Proteintaggar, som fusionspartners som används i rekombinant DNA-teknik, möjliggör effektiv affinitetsrening i ett steg för olika proteiner/peptider med olika egenskaper. Trots denna viktiga fördel kan taggar som exogena aminosyror förändra proteinstrukturen och biologiska funktioner. Därför är icke-märkta (tag-fria) proteiner eller peptider mer föredragna för att säkerställa säkerhet och effektivitet, särskilt inom det biofarmaceutiska området. Ett rekombinant protein med en fusionsmärkning har begränsade möjligheter att erhålla tillstånd från medicinska/läkemedelsadministrativa myndigheter.

Baserat på den mikrobiella biologiska FoU-plattformen, erbjuder Yaohai Bio-Pharma skräddarsydda icke-märkta (tag-fria) proteinberedningstjänster dedikerade till att uppfylla unika mål för forskning, utveckling och tillverkning för klinisk användning.

Nyckelord: taggfri proteinproduktion, omärkt proteinrening, gratis taggbaserad proteinberedning, taggfri proteinuttryck och rening, mycket taggfritt målprotein 

Tillämpning: humanmedicinsk forskning, utveckling av djurmedicin, utveckling av rekombinant vaccin, produktion av rekombinant biologiska stora molekyler

Vår mikrobiella FoU-plattform

Vi har erfarenhet av mikrobiell stamteknik, fermentering och produktrening.

Bakterie: Escherichia coli (E. coli)

Jäst: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Anpassade alternativ
Modalitet Rekombinant protein
Utgångsmaterial Gensekvenser, rekombinant plasmid eller konstruerade stammar
Deliverables Rening: >80%, >85%, >90% Kvantitet: 0.2~10 g (bestäms av projektet)
Uttryckssystem och bildning

E.coli periplasmatisk utsöndring, löslig och inklusionskroppsuttryck;

Jäst intracellulärt eller sekret uttryck

Analysmetoder Ultraviolett (UV), bicinchoninsyraanalys (BCA), Bradford eller Lowry för kvantitet
Natriumdodecylsulfatpolyakrylamidgelelektrofores (SDS-PAGE) för reningstestning
Valfritt: Western blot (WB), enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA), högpresterande vätskekromatografi (HPLC)
Resterande föroreningar Endotoxin (valfritt)
Service detaljer

Tjänster

Service detaljer

Minimal tidslinje (arbetsdag)

Gensyntes

Kodonoptimering för specifik uttrycksvärd

7 ~ 10 dagar

Gensyntes

Plasmid/vektorkonstruktion

Kloning in i plasmid/vektor

2 dagar

Plasmidtransformation

Verifiering av polymeraskedjereaktion (PCR), nedbrytning av restriktionsenzym, gensekvensering

3 dagar

Proteinuttryck i E.coli

Plasmidomvandling,

2 dagar

Odling i skakkolv

3 dagar

7L-sacle jäsning, optimering

4 dagar/batch

Tag-fri proteinrening, optimering

5~10 dagar/batch

Testning med natriumdodecylsulfatpolyakrylamidgelelektrofores (SDS-PAGE)

Proteinuttryck i jäst

Jäst kompetenta celler beredning

4 DAYS

Plasmidlinearisering och elektrotransformation

7L-sacle jäsning, optimering

5 DAYS

Tag-fri proteinrening, optimering

7 dagar/batch

Tag-fri proteinrening

5~10 dagar/batch

QC av SDS-PAGE

Ytterligare tjänster (valfritt)
Få en gratis offert

Kontakta oss