Yaohai Bio-Pharma erbjuder tjänster för N-terminalsekvensanalys och dataanalys baserade på vätskekromatografi-masspektrometri (LC-MS) eller Edman-degraderingsmetoden, vilket låter dig avgöra aminosyran vid respektive terminal av det intressanta proteinet. N-terminalmodifieringar kan också analyseras med LC-MS.
Vi har varit inblandade i Proteinstrukturell karaktärisering av olika stora molekyler, inklusive Recombinant Subunit Vaccines, Nanokroppar/VHHs/En-domänantikroppar (sdAbs), Antikroppsfragment, Hormoner/Peptider, Cytokiner, Växtfaktorer (GF), Enzymer, Kollagener mm.
Reglerkrav för N-terminalsekvensering
Enligt ICH Q6B-riktlinjerna är det nödvändigt att bekräfta sekvensen av ditt protein och undersöka terminalerna efter eventuella variationer som kan finnas.
Metoder för N-terminalsekvensering
Analys |
Metod |
N-terminal följd |
Edman-degradering, Vätskekromatografi-Masspektrometri (LC-MS) |
Procedurer
LC-MS
1. Protein N-terminal fluorescents märkning
2. Flera digestieringar
3. LC-MS/Masspektrometri (MS) analys
Edman degradering
1. Sodium Dodecyl Sulfat (SDS) gel elektrofores av ditt målprotein
2. Överför gel till Polyvinylidenedifluorid (PVDF) membraner och rättfärdigande
3. Identifiera och skär ut målproteinbandet
4. Edman sekvensering av N-terminus
5. Dataanalys