Betydelsen av stamscreening
Screening av lämpliga värdar är nödvändig för utveckling av biologiska CMC, vilket bestämmer kvaliteten och konsistensen hos produkten och tillverkningsprocessen. Det direkta syftet med värdscreening är att tillhandahålla en kandidat primär cellbank (PCB), med höga uttrycksnivåer och hög stabilitet både vad gäller passagestabilitet och lagringsstabilitet. Screening av lämplig värd är nödvändig av två huvudsakliga skäl:
- Först, att välja den mikrobiella värden med en hög uttrycksnivå. Det finns flera kommersiellt tillgängliga stammar, som används för att uttrycka olika typer av proteiner, som toxiska proteiner, lösliga proteiner eller eukaryota proteiner.
– För det andra att screena värden med genetisk stabilitet. Testning av genetisk stabilitet är en nyckelpunkt under hela produktionslivscykeln. Det föreslås att hög genetisk stabilitet erkänns som en annan nyckelegenskap för lämplig stam.
Nyckelord: urval av mikrobiell stam, screening av mikrobiell stam, screening med hög genomströmning av bakterier eller jäst, högproducerande stamscreening, mycket stabil stamscreening, genetisk stabil stamscreening Användning: humanmedicin, djurmedicin, vaccin, syntetisk biologi, rekombinant stor molekyl biologiska läkemedel, biologiskt reagens
Stamscreeningstjänster från Yaohai Bio-Pharma
Genom att dra nytta av över 10 års CDMO-erfarenhet inom mikrobiologisk biologi, stödjer vi utvecklingen och tillverkningen av olika stora molekyler, inklusive rekombinanta subenhetsvacciner, virusliknande partiklar (VLP), hormoner (insulin, GLP-1, tillväxthormon), cytokiner ( Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), tillväxtfaktorer (EGF, FGF, NGF), nanokroppar/enkeldomänantikroppar (sdAbs), enzymer, etc.
Vi har samlat rika erfarenheter av urval av olika typer av plasmidvektorer och mikrobiella värdar, inklusive bakterier Escherichia coli (E. coli), och jäst Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Vi kan hitta det bästa uttryckssystemet för dina unika biologiska läkemedel.
Vi samlade in olika mikrobiella värdar med tydliga källor och standard CoA, inklusive E. coli uttryck och jäst uttryck.
Service detaljer
|
Tjänster
|
Service detaljer
|
Minsta tidslinje/dag
|
Deliverables
|
|
Stamkonstruktion (E. coli)
|
Plasmidtransformation (multivärdar)
|
5
|
COA för kommersiella värdar Stamkonstruktionsrapport
|
|
PCR-verifiering
|
|
Stamrening
|
|
Stamkonservering
|
|
Stamkonstruktion (jäst)
|
Beredning av kompetenta jästceller
|
10
|
|
Plasmidlinjärisering
|
|
Elektrotransformation
|
|
Resistens/Näringsbristscreening
|
|
Stamrening
|
|
Stamkonservering
|
|
Lämplig värdscreening
|
Plasmid- eller genom-DNA-extraktion
|
15-20
|
VärdscreeningsprocessCOA för konstruerade stammar
|
|
PCR-verifiering, nedbrytning av restriktionsenzym
|
|
Målgensekvensering
|
|
Screening av höguttrycksvärdar
|
|
Screening av värdar med genetisk stabilitet
|
|
Stamkonservering
|
Fallstudie
En lämplig värd förbättrar proteinuttrycksnivån med 2.5 gånger.
Vi har i uppdrag att utveckla högproducerande E.coli anstränga. Och vi provade tre typer av reklam E.coli värdar, baserat på egenskaperna hos målprotein. Det har visat sig att stammen S1-1 och S1-2 (Fig A: Bana 1,2) förbättrade proteinnivån till 3.5 gånger än klientens initiala stam (Fig A: Bana 3).
Dessutom uppvisade stammen S1-1 hög genetisk stabilitet (Fig B), och den erkändes som kandidatstam för primär cellbanking (PCB).
Våra servicefunktioner
Demonstrerad expertis med olika mikrobiella värdar, t.ex. E.coli DH5a, TOP10, TranslO, BL10; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink stam 1/2/3/4; S. cerevisiae och H. polymorpha.
Vi har erfarenhet av E.coli periplasmisk sekretion, löslig och inklusionskroppsuttryck, såväl som intracellulärt eller sekretionsuttryck från jäst. Vi tillsätter inga antibiotika eller tillsätter antibiotika enligt myndighetsvägledning.
Vi etablerar en screeningplattform med hög genomströmning för att screena högproducerande och stabila stammar från över hundra kandidatstammar.
Det säkerställs att processen för strain engineering och screening är spårbar under Good Data and Record Management.
SV
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEJ
PL
PT
RO
RU
ES
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
