mRNA används vidare i studier av gener eller proteinkaraktärer. Samtidigt är det vanligt inom utvecklingen av förebyggande och terapeutiska biologiska medel. Som en vanlig syntesstrategi för RNA-molekyler möjliggör in vitro-transkription (IVT) oss att få anpassade transkripter effektivt.
Yaohai Bio-Pharma har etablerat en serie mRNA-syntestechniker för att erbjuda högkvalitativ RNA, såsom sekvensdesign och optimering, IVT, reningsprocesser, lyofilisering och lipidnanopartikel (LNP)-inkapsling. Alla produkter släpps under strikta kvalitetskontrollstandarder (QC).
Med utbrottet av COVID-19-pandemin 2020 har mRNA-teknologin framstigit i stora steg, och dess relaterade forskning och tillämpningar har fått en otillräcklig utveckling, inklusive preventiva vaccin mot infektionssjukdomar, terapeutiska cancer vaccin och läkemedel, tumörterapi, proteinknepningsbehandling, regenerativ medicin och cell- och generapi (CGT).
mRNA-vaccin | mRNA-terapeutikum |
|
Process | Valfritt tjänstetillbud | Tjänstdetaljer | Leveranstid (arbetsdag) | Leverans |
design och optimering av mRNA-sekvenser | Design och optimering av kodningssekvenser | CDS-sekvensdesign och kodonoptimering | 1-3 | Sekvensfil |
Design och optimering av icke-kodande sekvenser | Design och optimering av UTR, polyA-sekvenser | |||
Transkriptionsmallplasmid förberedelse | Rekombinant plasmidförberedelse | Gensyntes | 7-10 | |
Plasmidförstärkning och extraktion | 4 | |||
Plasmidlinjärisering och renad | ||||
mRNA Transkription in vitro | Ko-transkriptionell capping (en-stegs-metoden) | Transkription in vitro (IVT) / Cap analog | 1-2 | N/A |
Nukleotidmodifieringar (UTP/CTP modifieringar) | ||||
Borttagning av DNA-mall (DNase I) | ||||
Enzymatisk kapning (tvåstegsprocess) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotidmodifieringar (UTP/CTP modifieringar) | ||||
Borttagning av DNA-mall (DNase I) | ||||
mRNA-rening (lithiumklorid/magnetiska partiklar) | ||||
Enzymatisk kapning | ||||
mRNA-rengöring | Konventionell reningsmetod | Lithiumkloridprecipitering | 1 | mRNA-drugsämne |
Rening med magnetiska partiklar | ||||
Reningsmetod med kromatografikolonn | Kombination av flera kromatografi metoder | 1-2 | ||
Bufferutbyte | Ultrafiltrering | 1 | ||
mRNA lyofilisering | Lyofilisering | Förutfrysing | 2-3 | mRNA lyofiliserad pulver |
Primärtdrucking (sublimation) | ||||
Sekundärtdrucking (desorption) | ||||
mRNA inkapsling | LNP inkapsling | LNP inkapsling | 2-3 | mRNA-LNP läkemedelsprodukt |
Koncentration och buffertutbyte | ||||
mRNA-kvalitetsanalys | mRNA-dragsubstans / lyofiliserad pulver | Koncentration, renhet | 1 | Testrapport |
Integritet, capperings-effektivitet, polyA-svansfördelning | 2-5 | |||
mRNA-LNP-drug produkt | Encapserings-effektivitet | 1 | ||
Partikelform och fördelning | ||||
Yttesläge | ||||
mRNA-uttrycksvalidering | 293T-celleutvärdering | Cellplattning | 4 | |
Tillfällig transfection av celler | ||||
Observation av fluorescenssignal | 1-3 | |||
Western blot (WB) / Enzym-kopplad immunosorbensanalys (ELISA) |
5' Kap |
▪ Okapad ▪ Cap0, samtidigt kapad ▪ Cap1, samtidigt kapad ▪ Cap1, enzymatiskt kapslagnings |
5’ UTR/3’ UTR |
▪ Naturgemenskaplig UTR-sekvens ▪ Mutant/Modifierad UTR-sekvens |
3' PolyA-svans |
▪ 100A ~120A Svans (rekommenderad) ▪ Segmenterad polyA-svans ▪ Andra anpassade svansar |
Modifierade nukleosider |
▪ Omodifierade baser ▪ Pseudouridin (Ψ) ▪ N1-Methylpseudouridin (N1Ψ) ▪ 5-metylcytosin (m5C) ▪ 5-metyluridin (m5U) ▪ 5-metoxiuridin (5moU) ▪ 2-tiouridin (s2U) ▪ 2′-O-metyl-U ▪ Andra modificationer |
Integrerad tjänstflöde
Tillhandahåller en serie tjänster från förhandssekvensdesign till efterhandsmRNA-förberedelse, kvalitetskontroll och uttrycksvalidering.
Internationell framgångsrik sekvensdesign och optimering
Professionell design och optimering av mRNA-sekvenser möjliggör effektiv mRNA-uttryckning.
Diversifierade Nukleotidmodifieringar
Effektivt ökar mRNA-uttryckningen och minskar mRNA-relaterade oönskade immunsvar.
Mogen Reningsplattform
Genom att kombinera en konventionell och en självutvecklad reningsmetod erhålls mRNA-prover med hög renhet.
Fullständig Kvalitetskontrollplattform
Utökar QC-valmöjligheter för att uppfylla kraven på rutinprov, såsom koncentration, A260/280 renhet och integritet, samt höga kvalitetskontrolls krav, såsom cappnings-effektivitet/polyA-fördelning.
Snabb leverans
På beställning tillagd mRNA kan levereras inom 7 dagar, förutom extern sekvenssynthesis.