Nyckelenzymer för lång-RNA-produktion
mRNA, som en typ av lång kodande RNA, fungerade säkert och effektivt hos en bredare grupp av människor under COVID-19. Andra långkodande RNAs, såsom självaförstärkande RNA (saRNA) och cirkulär mRNA (circRNA), visade också effektivitet i prekliniska och kliniska studier.
Storskalig produktion av långkodande RNA beror på in vitro-transkription (IVT) genom flera enzymatiska reaktioner. Stegen i RNA-produktionen omfattar förberedelse av mall-DNA, IVT-RNA-syntes, cirkulation, DNA-borttagning, RNA-modifikation (capping och tailing) och RNA-rening.
Det finns flera nyckelenzymer som används i produktionen av långkodande RNA (t.ex. mRNA, saRNA och circRNA), inklusive restriktionsendonukleaser, T7 RNA-polymeras (T7 RNAP), RNase-inhibitor, inorganisk pyrofosfatase, DNase I, vaccinia-cappingsenzyme och RNase R.
|
Process
|
Enzym
|
Funktion
|
|
Förberedelse av mall-DNA
|
Restriktionsendonukleaser
|
Linjärisering av plasmid DNA (pDNA) för att undvika att skapa längre transkript.
|
|
IVT RNA-syntes
|
T7 RNA polymeras (T7 RNAP)
|
Bind till T7-promotor och generera specifikt RNA-transkript; Spela en nyckelroll under IVT-reaktionen.
|
|
RNase-inhibitor, rekombinant
|
Inhiberar RNase-aktivitet under IVT-reaktionen.
|
|
Pirofosfatase, inorganisk (iPPase)
|
Förhindrar pirofosfat under IVT-reaktionen.
|
|
DNA-borttagning
|
DNase I
|
Ta bort DNA-mallen.
|
|
RNA-modifikation
|
Vaccinia kapningsenzym
|
Lägg till Cap1-strukturer på 5′-endarna av IVT-mRNA.
|
|
2’-O-Metyltransferas
|
| circRNA-förstärkning |
Rnase R |
Förädlings av linjär RNA och berikning av cirkulär RNA. |
Yaohai Bio-Pharma erbjuder en total CDMO-lösning för enzym
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
