Рекомбинантен ензим за терапевтска употреба
Терапевтските ензими добиени преку биотехнолошки процеси се широко користени за неколку клинички апликации, вклучително и ензимска заместителна терапија, деградација на акумулираните метаболити и токсини, третман на рак и уредување на геномот. Неколку терапевтски ензими може да се произведат во системот на микробиолошка експресија.
Рекомбинантен ензим како материјал
Постојат неколку ензими кои се користат за долготрајно кодирачко производство на РНК (на пример, mRNA, saRNA, circRNA), производство на антитела-лек конјугати (ADCs) и други. Ензимите произведени од микроби се поисплатливи од клетките на цицачите, особено Е. coli изразниот систем.
|
апликација
|
Ензими
|
функција
|
|
Ензими за линеарно производство на РНК, без RNase
|
Рестриктивни ендонуклеази
|
Линеаризација на плазмидната ДНК (pDNA) за да се избегне генерирање подолг транскрипт.
|
|
T7 RNA полимераза (T7 RNAP)
|
Поврзете се со промоторот Т7 и генерирате специфичен транскрипт на РНК; Играјте клучна улога за време на реакцијата на ин витро транскрипт (IVT).
|
|
Ензим за покривање на вакцини
|
Додадете капа структури на 5' краевите на IVT mRNA.
|
|
Пирофосфатаза, неорганска (iPPase)
|
Спречете го пирофосфатот за време на IVT реакција.
|
|
Инхибитор на RNase, рекомбинантен
|
Инхибирајте ја активноста на RNase за време на IVT реакцијата.
|
|
DNase I
|
Отстранете ја шаблонот за ДНК.
|
|
Ензим за производство на circRNA, без RNase
|
RNase R
|
Дигестирајте ја линеарната РНК и збогатете ја кружната РНК.
|
|
Ензимско-посредувана гликанска конјугација
|
Пептид-N-гликозидаза (PNGаза F)
|
Ја раскинува амидната врска помеѓу првиот сахарид GlcNAc и страничниот ланец Asn297L; Ослободете ги гликаните од IgG антителата.
|
|
Бактериска трансглутаминаза (BTG)
|
Конјугирајте носивост конкретно на локацијата за да генерирате ADC.
|
|
Сортаза А
|
Катализирајте ја врзувањето на протеините.
|
|
β1,4-галактозидаза
|
Ослободете ги сите терминални галактози и формирајте хомогена G0 изоформа на антителото.
|
|
β1,4-галактозилтрансфераза (Gal-T)
|
Пренесете остаток од шеќер со хемиски реактивна функционална група.
|
|
α2,6-сиалилтрансфераза (Sial T)
|
Инкорпорирајте терминални остатоци од сијална киселина во структурата на природната гликана на антителото.
|
|
Ензимско-посредувано ремоделирање на гликан и гликоинженеринг
|
Ендо-N-ацетилглукозаминидаза (ENGase)
|
Хидролизирајте ја β1,4-гликозидната врска помеѓу GlcNAcβ1–4GlcNAc на N-гликаните; Отстранете ги N-поврзаните гликани на Fc регионот на IgG антителата.
|
|
Ендогликозидаза S (EndoS)
|
|
|
Гликосилтрансферази (ГТ)
|
Трансфер на N-гликан оксазолин во дефукозилирани IgG.
|
|
други, пак,
|
Ензими произведени од микробиолошки соеви
|
Прилагодена потреба
|
Рекомбинантен ензим како реагенс
Протеази за отстранување на ознаки
Фузивни ознаки често се користат за да се подобри растворливоста и стабилноста на рекомбинантните протеини од интерес и да се олесни нивното прочистување. Најчесто користените ознаки вклучуваат His-tag, малтоза-врзувачки протеин (MBP), глутатион-s-трансфераза (GST) итн.
Вообичаено, секвенцата за поврзување се додава помеѓу фузионата ознака и целната протеинска секвенца за да се отстрани ознаката. Отстранувањето на фузиските ознаки бара протеази специфични за локацијата, како што се ентерокиназа (EK), тромбин, протеаза на вирусот на тутун еч (TEVp), хуман риновирус протеаза 3C (HRV3C), мал протеаза што го модифицира убиквитин (SUMO), протеаза на вените на тутунот ( TVMV) протеаза и карбоксипептидаза A/B (CPA/CPB).
|
тип
|
Ензими
|
Сајт за препознавање
|
|
Ендопротеази за отстранување на ознаки
|
Ентерокиназа (ЕК), ентеропептидаза
|
ДДДДК↓
|
|
тромбин
|
LVPR↓GS
|
|
ТЕВ протеаза
|
ENLYFQ↓G
|
|
HRV3C протеаза
|
LEVLFQ↓GP
|
|
СУМО протеаза
|
SUMO терцијарна структура
|
|
TVMV протеаза
|
ETVRFQG↓S
|
|
Егзопротеази за отстранување на ознаки
|
Карбоксипептидаза А (CPA)
|
Ц-терминални амино киселини, освен Pro, Lys и Arg
|
|
Карбоксипептидаза Б (CPB)
|
Ц-терминал Lys и Arg
|
Други протеази, нуклеази и амидази
|
апликација
|
Ензими
|
функција
|
|
Други протеази
|
Протеаза К
|
Серин протеаза која ги вари протеините со хидролизирање на пептидните врски.
|
|
IdeS, IgG протеаза
|
IgG деградирачки ензими (Ides) кои се расцепуваат на одредена локација на имуноглобулин G (IgG), генерирајќи Fab и Fc фрагменти
|
|
IgA1 протеаза
|
Протеолитички ензим кој расцепува специфично место во секвенцата на шарката на човечкиот имуноглобулин А1 (IgA1).
|
|
Нуклеаза
|
Нуклеаза
|
Ги расцепува нуклеинските киселини (ДНК или РНК) со хидролизирање на фосфодиестерските врски.
|
|
Ограничете го ензимот
|
Ендонуклеаза која ја расцепува ДНК на или во близина на одредени места.
|
|
Амидаза
|
PNG-аза F
|
Се расцепува помеѓу највнатрешниот N-ацетилглукозамин (GlcNAc) и остатоците од аспарагин од висока маноза, хибридни и сложени олигосахариди.
|
Yaohai Bio-Pharma нуди еднократно CDMO решение за рекомбинантни ензими
Суд:
[1] Hennigan JN, Линч MD. Минатото, сегашноста и иднината на терапии базирани на ензими. Дрога Discov денес. 2022 јануари; 27 (1): 117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
