Значењето на развојот на нагорниот процес
Процесот нагоре (USP), исто така познат како процес на ферментација, е една од почетните фази на горното биопроцесирање. Процесот на микробна ферментација е од клучно значење за клеточна култура со висока густина и експресија на егзогени гени, што директно влијае на приносот и цената на биолошките препарати.
Во раните фази на развојот на биолошките средства (предклинички или фаза 1/2), фокусот е да се развијат скалабилни процеси без животни со среден принос и да се исполнат сите стандарди за квалитет на производот.
Додека сме во доцните фази (фаза 3 или комерцијални), ќе се фокусираме на приносот, робусноста, приспособливоста и репродуктивноста, генерирајќи економичен процес. Активностите кои се занимаваат со овие прашања се карактеризација на процесите и студии за валидација на процеси. Во меѓувреме, обично се применуваат алатки за квалитет по дизајн (QbD) и дизајн на експерименти (DoE).
Клучни зборови: развој на процес, оптимизација и валидација, процес на ферментација, ферментација на микробиолошки клетки, ферментација на бактерии, ферментација на квасец, ферментација со висока густина, ферментација со инженерски соеви
Апликација: Биофармацевтска индустрија, човечка медицина, медицина за животни, вакцина, рекомбинантна биологија со големи молекули, рекомбинантна биологија, биолошки реагенс
USP решенија на Јаохаи Био-Фарма
Искористувајќи ги придобивките од повеќе од 10 години искуство со микробна ферментација, Јаохаи Био-Фарма има експертиза да помогне во решавањето на предизвиците на процесот на ферментација. Можеме брзо да воспоставиме стратегии за ферментација со висока густина за Ешерихија коли (E. coli) периплазматска секреција, интрацелуларна растворлива или инклузивна телесна експресија и екстрацелуларна или интрацелуларна експресија на квасец.
Нашите достапни општи услуги за развој на ферментација вклучуваат:
- Дизајнот на процесот на ферментација изведен во мал обем од 7L во режим на напојување
- Валидација на процесот во три серии во ферменти од 7 литри
- Средно процесно размерување до 30L/70L
Можеме флексибилно да извршиме оптимизација со повеќе параметри за да го исполниме саканиот принос или пропорција, користејќи еднократен фактор (OTAF) или дизајн на експерименти (DoE).
Клучните параметри за ферментација се наведени како што следува:
Композиции за медиум за ферментација без животни
Без антибиотици или не, волумен на инокулум
Температура на раст, pH, ниво на растворен кислород (DO).
Режим на хранење (на пр. напојување-серија)
Концентрација на индуктор (на пример, IPTG, метанол), точка на индукција (влажна тежина на клетките/OD600),
Температура на индукција, време на индукција
итн
Детали за услугата
| Услуги |
Процес на проток |
| Одгледување во колба за шејк (500 mL) |
Подготовка на медиум без животни → Одгледување на микробиолошки семиња → Одгледување во шејкер → Индукција → Жетва |
| Одгледување во ферментер (7 L) |
Подготовка на медиум без животни → Одгледување на микробиолошки семиња → клеточна ферментација со висока густина во 7L биореактор → Индукција → Жетва |
| Контрола на квалитет на протеини/пептиди |
Предтретман Интрацелуларен растворлив израз: Собирање и ресуспензија на микробни клетки → Ултразвучно дробење → Отстранување на клеточни остатоци → Суров екстракт Израз на телото: Жетва и ресуспензија на микробни клетки → ултразвучно дробење → подготовка на тело за инклузија → Екстрацелуларен растворлив екстракт → екстрацелуларен растворлив екстракт: екстрацелуларен растворлив екстракт: размена → Суров екстракт Анализа на квалитет Суров екстракт како примерок → Анализа на целни протеини со SDS PAGE или Western blotting (WB) |
| Контрола на квалитет на плазмиди |
Предтретман и анализа на квалитет Екстракција на плазмида → анализа на ДНК со електрофореза со гел агароза |
студија на случај
Нарачавме од нашиот клиент да го зголемиме целниот принос на полипептиден хормон од 8 g/L на 10 g/L.
Врз основа на целосниот факторски дизајн и дизајнот на површината на одговор во алатките DoE, брзо ги препознавме и оптимизиравме клучните параметри за ферментација. Под оптимизираниот процес на ферментација со висока густина на клетките, нивото на изразување се зголеми на 10 g/L.
Нашите искуства
- Работевме на различни видови на микробиолошки домаќини, на пр. E.coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink сој 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) Hansenula polymorpha (H. polymorpha).
- Ние сме искусни со E. coli периплазматска секреција, растворлива и инклузивна телесна експресија, како и интрацелуларна или екстрацелуларна експресија на квасец. Приносот на инклузивното тело е до 10 g/L, додека приносот на растворливите протеини се движи од 0.5 до 15 g/L.
- Ние сме вклучени во развојот и производството на различни големи молекули, вклучувајќи вакцини за рекомбинантна подединица, честички слични на вируси (VLPs), хормони (инсулин, GLP-1, хормон за раст), цитокини (Интерлеукин-2/IL-2, IL -15, IL-21), фактори на раст (EGF, FGF, NGF), нанотела/ антитела со еден домен (sdAbs), ензими итн.
- опрема
7L*16 Систем за ферментација
Cedex Bio Analyzer, Bioprocess анализатор
MK
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
UR
BN
