Значењето на скрининг на вирус
Скрининг соодветните домаќини е неопходен за развој на CMC на биолошките средства, што го одредува квалитетот и конзистентноста на производот и процесот на производство. Директната цел на скринингот на домаќинот е да се обезбеди кандидатска примарна клеточна банка (PCB), со високи нивоа на изразување и висока стабилност и во смисла на стабилност на премин и стабилност на складирање. Скринингот на соодветен домаќин е неопходен од две главни причини:
- Прво, да се избере микробиолошки домаќин со високо ниво на изразување. Постојат повеќе комерцијално достапни соеви, кои се користат за изразување на различни видови протеини, како токсични протеини, растворливи протеини или еукариотски протеини.
- Второ, да се направи скрининг на домаќинот со генетска стабилност. Тестирањето на генетската стабилност е клучна точка во текот на животниот циклус на производството. Се сугерира дека високата генетска стабилност е препознаена како друга клучна карактеристика за соодветен вид.
Клучни зборови: селекција на микроби, скрининг на микробиолошки соеви, скрининг на бактерии или квасец со голема брзина, скрининг на соеви со висока продукција, скрининг на соеви со висока стабилност, скрининг на генетски стабилен сој Апликација: човечка медицина, медицина за животни, вакцина, синтетичка биологија, рекомбинантна голема молекула биолошки средства, биолошки реагенс
Скрининг услуги на Јаохаи Био-Фарма
Имајќи корист од повеќе од 10 години CDMO искуство во микробиолошки биолошки производи, го поддржуваме развојот и производството на различни големи молекули, вклучувајќи вакцини со рекомбинантна подединица, честички слични на вируси (VLP), хормони (инсулин, GLP-1, хормон за раст), цитокини ( Интерлеукин-2/IL-2, IL-15, IL-21), фактори на раст (EGF, FGF, NGF), нанотела/антитела од еден домен (sdAbs), ензими итн.
Имаме акумулирано богато искуство во изборот на различни видови плазмидни вектори и микробни домаќини, вклучувајќи ги и бактериите Ешерихија коли (E. coli), и квасец Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Можеме да го најдеме најдобриот изразен систем за вашите уникатни биолошки средства.
Собравме различни микробни домаќини со јасни извори и стандарден CoA, вклучувајќи E.coli изразување и изразување квасец.
Детали за услугата
Услуги
|
Детали за услугата
|
Минимум времеплов/ден
|
Испораки
|
Конструкција на соеви (E. coli)
|
Трансформација на плазмиди (мулти-домаќини)
|
5
|
COA на комерцијални домаќини Извештај за изградба на вирус
|
ПЦР верификација
|
Прочистување на вирус
|
Зачувување на вирус
|
Конструкција на цедилка (квасец)
|
Подготовка на компетентни клетки од квасец
|
10
|
Линеаризација на плазмидите
|
Електро трансформација
|
Скрининг за отпорност/нутритивен дефицит
|
Прочистување на вирус
|
Зачувување на вирус
|
Соодветен скрининг на домаќинот
|
Екстракција на ДНК на плазмид или геном
|
15-20
|
Процес на скрининг на домаќин COA на инженерски соеви
|
ПЦР верификација, дигестија со рестриктивен ензим
|
Секвенционирање на целните гени
|
Скрининг на домаќини со висок израз
|
Скрининг на домаќини со генетска стабилност
|
Зачувување на вирус
|
студија на случај
Соодветниот домаќин го подобрува нивото на протеинска експресија за 2.5 пати.
Нарачани сме да развиеме високопроизводство E. coli вирус. И пробавме три типа на реклами E. coli домаќини, врз основа на карактеристиките на целниот протеин. Се покажа дека сојот S1-1 и S1-2 (слика А: Лен 1,2) го подобриле нивото на протеини до 3.5 пати од почетниот вид на клиентот (слика А: лента 3).
Освен тоа, сојот S1-1 имаше висока генетска стабилност (слика Б), и беше препознаен како сој кандидат за примарно банкарство на клетки (PCB).
Нашите карактеристики на услугата
Покажана експертиза со различни микробни домаќини, на пр. E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink сој 1/2/3/4; S.cerevisiae H. полиморфа.
Ние сме искусни со E. coli периплазматска секреција, растворлива и инклузивна телесна експресија, како и интрацелуларна или секретна експресија на квасец. Не додаваме антибиотици или ги додаваме антибиотиците под регулаторно водство.
Воспоставуваме платформа за скрининг со висока пропусност за да ги прегледаме високопродуктивните и стабилни соеви од над сто кандидатски соеви.
Се гарантира дека процесот на инженерство и скрининг може да се следи, според Доброто управување со податоци и записи.