mRNA е шiroко користена во истражувањето на функциите на гени или протеини. Од друга страна, често се користи при развојот на профилактивни и лековити биолошки производи. Како обична стратегија за RNA синтеза, транскрипцијата во тест (IVT) ни овозможува да добиеме подредени транскрипти ефикасно.
Yaohai Bio-Pharma ја изградила целокупна технологија за синтеза на mRNA за да пружи висококвалитетен RNA, како што се дизајн и оптимизација на секвенци, IVT, чишћење, лиофилизирање и енкапсулирање во липидни наночестици (LNP). Сите производи се освободуваат под строги стандарди за контрола на квалитетот (QC).
Со избучувањето на пандемијата од КОВИД-19 во 2020, мРНК технологијата се напреднала со гигантски koraci, и неговите поврзани истражувања и апликации добија небивален развој, вклучувајќи профилактички вакцини за спречување на инфекциозни болести, терапевтички онкологички вакцини и лекови, терапија против туморите, протеинска заместителна терапија, регенеративна медицина и клеточна и генска терапија (CGT).
mRNA вакцина | мРНК Терапевтичка |
|
Процес | Опционална Услуга | Детали за услугата | Период на Издржувачење (работен ден) | Доставливаемо |
дизајн и Оптимизација на мРНК Секвенца | Дизајн и оптимизација на кодирачките секвенци | Дизајн на секвенца на ЦДС и оптимизација на кодони | 1-3 | Датотека со секвенца |
Дизајн и оптимизација на не-кодирачki секвенци | Дизајн и оптимизација на УТР, полиА секвенци | |||
Припрема на транскрипционата плазмидна шаблон | Припрема на рекомбинантен плазмид | Синтеза на ген | 7-10 | |
Амплификација и екстракција на плазмид | 4 | |||
Линеаризација и чистење на плазмид | ||||
транскрипција на mRNA во vitro | Ко-транскрипциона капирање (едночлен метод) | Транскрипција во vitro (IVT) / Аналог на кап | 1-2 | Недостапно |
Модификација на нуклеотидите (модификација на UTP/CTP) | ||||
Отстранување на ДНК темплет (ДНаза I) | ||||
Ензимско капирање (двочлен процес) | IVT | 2-3 | ||
Модификација на нуклеотидите (модификација на UTP/CTP) | ||||
Отстранување на ДНК темплет (ДНаза I) | ||||
почистување на mRNA (хлорид литиjум/магнетски честички) | ||||
Ензимско капирање | ||||
чистење на mRNA | Традициона схема за почистување | Преципитација со хлорид на литиум | 1 | мРНК друски материјал |
Чистење со магнетски жички | ||||
Шема за чистење со колона хроматографија | Комбинација на повеќе методи на хроматографија | 1-2 | ||
Замена на буфер | Ультрафилтрирање | 1 | ||
лиофилезација на mRNA | Лиофилезација | Претходно замразување | 2-3 | мРНК лиофилизиран порошок |
Првично исушување (сублимација) | ||||
Вторично исушување (десорбција) | ||||
mRNAЕнкапсулирање | Енкапсулација LNP | Енкапсулација LNP | 2-3 | mRNA-LNPЛековен производ |
Концентрација и замена на буфер | ||||
анализа на квалитет на mRNA | mRNA лековен супстанција/ лиофилизиран прах | Концентрација, чистота | 1 | Извод за тестови |
Целост, ефикасност на капирање, дистрибуција на полиA хвост | 2-5 | |||
продукт на дружба mRNA-LNP | Ефикасност на енкапсулирање | 1 | ||
Големина на честици и распределба | ||||
Површински најав | ||||
валидација на изразот на mRNA | евалуација на 293T клетки | Поставување на клетки | 4 | |
Превремена трансфекција на клетки | ||||
Набљудување на флуоресцентен сигнал | 1-3 | |||
Западен блот (WB) / Ензим-линкована имунноасорбентна асая (ELISA) |
5' Кап |
▪ Без кап ▪ Cap0, заеднички капиран ▪ Cap1, заеднички капиран ▪ Cap1, ензимско капирање |
5’ UTR/3’ UTR |
▪ Природен UTR низ ▪ Мутантски/инжеериран UTR низ |
3' PolyA Хвост |
▪ 100A ~120A Хвост (препорачани) ▪ Сегментиран полиA хвост ▪ Други прилагодени хвости |
Модифицирани нуклеозиди |
▪ Не модифицирани бази ▪ Псевдouriдин (Ψ) ▪ N1-Метилпсевдouriдин (N1Ψ) ▪ 5-метилцитозин (m5C) ▪ 5-метилуридин (m5U) ▪ 5-метоксиуридин (5moU) ▪ 2-тиоуридин (s2U) ▪ 2′-O-метил-У ▪ Други модификација |
Интегриран поток на услуги
Нудење на серија услуги од дизајнот на низата во почетокот до припремата на mRNA, контролата на квалитетот и валидацијата на изразот.
Дизајн и оптимизација на низи според меѓународни стандарди
Професионален дизајн и оптимизација на mRNA низите кои олеснуваат ефикасен израз на mRNA.
Диверсифицирани модификација на нуклеотидите
Ефективно зголемува изразот на mRNA и се сведува неочекуваните имунолошки одговори на mRNA.
Зрел Платформ за Чистење
Со kombiniranje на конвенционален и самодизајниран метод за чистење, се добиваат mRNA примероци со висока чистота
Пополнет Платформ за Контрола на Квалитетот
Обогатени опции за QC за да задоволат потребите на рутинските тестови, како што се концентрација, A260/280 чистота и интегритет, како и заисклучоци со висок контролен квалитет, како што се ефикасност на капирање/полиA дистрибуција.
Брза испорака
Прилагодената mRNA може да биде испоракана во текот на 7 дена, осим во случаите на надворешно синтезирана секвенца.