Прилагодена синтеза на saRNA
Самозасилувачката мРНК (саРНК), позната и како репликонска РНК, ги кодира секвенците на мРНК на ин витро транскрипција (IVT) и гени на вирусна репликаза добиени од алфавирус или флавивируси. Вирусните репликазни гени овозможуваат самозасилување на mRNA, што резултира со зголемена протеинска експресија и минимална потребна доза на РНК во споредба со незасилувачките mRNA. Друг аспект е дека saRNA е релативно голема молекула (повеќе од 14 kb).
Yaohai Bio-Pharma има воспоставено сет на технологии за синтеза на mRNA за да обезбеди незасилувачка mRNA и самозасилувачка mRNA (1000 nt~14000 nt), како што се дизајнирање и оптимизација на секвенците, IVT, прочистување, лиофилизација и липидни наночестички (LNP) . Сите производи се пуштаат под строги стандарди за контрола на квалитетот.
Сл.1 Структурни карактеристики на IVT mRNAs: Конвенционална, кружна и самозасилувачка mRNA.
Секвенца Карактеристики на самозасилувачка mRNA
Самозасилувачката РНК содржи четири неструктурни протеини (означени како nsP1, nsP2, nsP3 и nsP4), кои се добиени од алфавируси, венецуелски коњски енцефалитис вирус (VEEV). Меѓу нив, nsP1 покажува двојни ензимски активности, имено GTase и N7MTase, додека nsP2 поседува RTPase активност, клучна за ограничување на IVT mRNA за генерирање на структурата Cap 0. Дополнително, nsP2 служи како протеаза и хеликаза, што ја олеснува сложената обработка на целиот nsP комплекс. Прецизната функција на nsP3 останува неостварлива, но сепак тој се впушта во интеракции со различни протеини на клетката домаќин, а со тоа придонесува за слабеење на антивирусниот одговор поставен од домаќинот.
Регионот на субгеномски промотор на алфавирус (SGP) се наоѓа пред генот од интерес (ГОИ). Елементот SGP го олеснува започнувањето на GOI транскрипцијата со заобиколување на читањето на секвенцата што ги кодира вирусните nsP протеини.
Сл.2 Синтеза и клеточни анализи на eGFP saRNA на Yaohai Bio-Pharma RNASci платформата.
Прилагодени решенија на saRNA
Протоколот за синтеза на saRNA е сличен на mRNA: Прилагодена синтеза на mRNA
- Дизајн на секвенци
- Подготовка на плазмид шаблон
- ин витро транскрипција (IVT)
- mRNA Ензимско покривање
- mRNA Ко-транскрипција Ограничување
- mRNA прочистување
- mRNA лиофилизација
- LNP енкапсулација
- Анализа и тестирање
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
