Припремата на CircRNA бара линеарен RNA како предшествувачки материјал (RNA предшествувач) за циклирање, каде што RNA предшествувачот обично се приготвува користејќи линеаризиран плазмиден DNA како транскрипцион шаблон и транскрипиран во vitro со помош на T7 RNA полимераза.
Висококвалитетниот плазмиден DNA е од vitalно значење за транскрипцијата во vitro (IVT). Базирано на зрелата платформа за припрема на плазмид, Yaohai Bio-Pharma може да нуди услуга за припрема на плазмиден DNA (pDNA) со висока чистота и стандард за да се осигура целоста на продуктите IVT.
Детали за Услугите
| Процес |
Опционална Услуга |
Детали за услугата |
Период на Издржувачење (работен ден) |
| Припрема на циркуларен плазмид |
Синтеза на ген |
Синтеза на ген (Трећа страна) |
7-10 |
| Амплификација на плазмид |
Амплификација на плазмид |
2 |
| Екстракција на плазмид |
| Припрема на линеаризиран плазмид |
Линеаризација и чистење на плазмид |
Линеаризација на плазмид |
1 |
| Чистење на ДНК при линеаризација |
| Контрола на квалитетот на плазмидна ДНК |
Концентрација чистота |
Ултравиолет (UV) спектрофотометрија |
1-2 |
| Плаzmид конформација |
Агарозна гел електрофореза (AGE) |
| Капиларна електрофореза (CE)-Опционално |
| Плаzmид идентификација |
Идентификација со рестрикциона ензима/AGE |
Нашите карактеристики
Гибела избор на методите за линеаризација
- Висок процент на опорабување
Оптимизација на методите за екстракција и чистење на ДНК за да се постигнат високи проценти на опорабување.
- Строга контрола на квалитетот
Строги стандарди на контрола на процесот, со процент на суперхелична конформација на плазмидни примероци за истражување поголем од 80%.
Високи стандарди и ефикасни услуги за припрема и контрола на квалитетот на плазмиди за да се задоволат експерименталните потреби.
Студија на случај
Како пример, земаме продуктот mCherry circRNA од Yaohai Bio-Pharma, при што процентот на супервивлена форма на транскрипционите плазмидни примероци (за истражување) е повеќе од 70%, со линеаризационен процент близок до 100%.
mCherry circRNA се приготвува користејќи линеаризиран плазмид како темплат и се трансфектира во 293T клетки. Се детектира високо ниво на експресија на флуоресценција (црвена флуоресценција) 24 часа по трансфекцијата, која ќе се зголеми след 48 часови, и може да се детектира и на седмиот ден и на четирдесетиот ден по трансфекцијата.
протеинот mCherry е стабилно и ефикасно изразен, а чистотата на транскрипционалниот шаблон може да задоволи заhtевите на продуктот од циркуларен RNA со висока квалитета (DP).
Валидација на ин vitro израз на mCherry циркуларен RNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
