Подготовката на CircRNA бара линеарна РНК како прекурсорски материјал (РНК прекурсор) за циклизација, каде што РНК прекурсорот обично се подготвува со користење на линеаризирана плазмидна ДНК како шаблон за транскрипција и транскрибиран ин витро со помош на Т7 РНК полимераза.
Висококвалитетната плазмидна ДНК е од суштинско значење за ин витро транскрипција (IVT). Врз основа на платформата за услуга за подготовка на зрели плазмиди, Yaohai Bio-Pharma може да обезбеди услуга за подготовка со висока чистота и стандардна линеаризирана плазмидна ДНК (pDNA) за да се обезбеди интегритет на IVT производите.
Детали за услуги
| Процесот на |
Факултативна услуга |
Детали за услугата |
Период на испорака (работен ден) |
| Кружна плазмидна подготовка |
Синтеза на гени |
Синтеза на гени (трета страна) |
7-10 |
| Плазмидно засилување |
Плазмидно засилување |
2 |
| Плазмидна екстракција |
| Линеаризирана плазмидна подготовка |
Линеаризација и прочистување на плазмидите |
Линеаризација на плазмидите |
1 |
| Линеаризација ДНК прочистување |
| Контрола на квалитетот на плазмидната ДНК |
Чистота на концентрацијата |
Ултравиолетова (УВ) спектрофотометрија |
1-2 |
| Плазмидна конформација |
Електрофореза со гел агароза (AGE) |
| Капиларна електрофореза (CE) - по избор |
| Плазмид се идентификуваат |
Идентификација на рестриктивен ензим/ AGE |
Нашите карактеристики
Флексибилен избор на методи за линеаризација
- Висока стапка на закрепнување
Оптимизација на методите за екстракција и прочистување на ДНК за да се постигнат високи стапки на обновување.
- Строга контрола на квалитетот
Строги стандарди за контрола на процесот, со суперспирална стапка на конформација на плазмидните примероци за истражување од над 80%.
- Процес на зрела платформа
Услуги за подготовка и контрола на квалитетот на плазмидите со висок стандард и висока ефикасност за задоволување на експерименталните потреби.
студија на случај
Земајќи го како пример производот mCherry circRNA на Yaohai Bio-Pharma, суперсвитканиот однос на плазмидните примероци на шаблоните за транскрипција (истражувачко одделение) е повеќе од 70%, со стапка на линеаризација од близу 100%.
mCherry circRNA се подготвува со линеаризиран плазмид како шаблон и се трансфицира во 293T клетки. Високо ниво на флуоресцентна експресија (црвена флуоресценција) се открива по 24 часа од трансфекцијата, што ќе се засили по 48 часа, а сепак може да се открие на 7-ми и 14-ти ден по трансфекцијата.
Протеинот mCherry се изразува стабилно и ефикасно, а чистотата на шаблонот за транскрипција може да ги исполни барањата за циркРНК лек производ (DP) со висок квалитет.
Ин витро валидација на изразување на mCherry circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
