Во споредба со двостепеното ензимско покривање, методот на ко-транскрипциско покривање во еден чекор може значително да го намали протокот на процесот. Методот е ориентиран кон резултат и вклучува додавање на аналози на капа во реакцијата на транскрипција ин витро (IVT). Аналози на капа може да се воведат на почетокот на транскрипцијата, а mRNA со структура на капа може да се добие по завршувањето на транскрипцијата. Тековните аналози на капа од трета генерација можат да избегнат обратно затворање и директно да ја додадат структурата на капа 1 на производот за транскрипција.
За разгледување на имуногеноста на mRNA in vivo и ефикасноста на транслацијата, процесот на IVT често усвојува одредени видови на модифицирани NTP, а вообичаени модифицирани нуклеотиди се псеудуридин (Ψ), N1-метил-псевдури-дин (N1Ψ) и 5-метилцитозин (5 mC) .
Слика: Дијаграм на тРНК ко-транскрипциона и реакција на покривање
Детали за услугата
Сервис |
Детали за услугата |
Период на испорака (работен ден) |
Ко-транскрипциско ограничување |
Ин витро транскрипциски одговор (аналог на Clean Cap) |
1-2 |
| Нуклеотидни модификации (Ψ/N1Ψ/5mC) |
| Отстранување на ДНК шаблон (DNase I) |
Оптимизација на IVT состојба - опционално |
Дизајн и оптимизација на компонентата за реакција |
3-7 |
Нашите карактеристики
- Диверзифицирани стратегии за модификација на нуклеотиди
Повеќекратните опционални стратегии за модификација на нуклеотид може да ја подобрат протеинската експресија.
- Оптимизиран систем за реакција
Постигнете висок сооднос на транскрипција и висока ефикасност на покривање.
- Стабилен процес на покривање
Постигнете стапка на ограничување од повеќе од 95%.
Спречете ефикасно разградување на mRNA со строго контролирање на RNase во експерименталната средина и потрошен материјал.
студија на случај
Yaohai Bio-Pharma има изградено зрела платформа за процес на ко-транскрипциско покривање, користејќи аналози на чисти капа за директно додавање на структурата Cap1 додека избегнува обратно ограничување. По стандардизиран пред-третман на примерокот и откривање на капиларна електрофореза (CE), стапката на затварање на подобрениот зелен флуоресцентен протеин (eGFP) mRNA може да достигне повеќе од 95%.
eGFP mRNA закривување ефикасност од повеќе од 95%
eGFP mRNA и mCherry mRNA подготвени со ко-транскрипциско покривање се трансфектираат во 293T клетки, соодветно, и силен флуоресцентен сигнал се забележува по 48 часа, што сугерира дека mRNA е ефикасно изразена во 293T клетки.
Експресија на eGFP mRNA и mCherry mRNA во 293T клетка
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
