Циркуларната mRNA (circRNA) е широко користена во истражувањето на функциите на гени или протеини. Од друга страна, таа е популарна и во развојот на профилактивни и терапевтички биолошки, слично на mRNA.
Yaohai Bio-Pharma ја заснова целина технологија за синтеза на circRNA за да обезбеди висококвалитетна RNA, како што се дизајн и оптимизација на секвенци, транскрипција во vitro (IVT), циркуларизација/цикланизација, чистење и инкапсулирање во липидни наночестици (LNP). Сите производи се издаваат под строгите стандарди на контрола на квалитетот (QC).
Според линеарната mRNA, циркуларната RNA (circRNA) е повеќе стабилна во структура и е голем изразен интерес во моменталното истражување на нуклеински лекови. Тоа има широка примена во различни области, дали како кодира circRNA или не-кодира circRNA, вклучувајќи профилактички ваксини за инфективни болести, терапевтички онколошки ваксини, терапевтички онколошки лекови, протеинска заместителна терапија, регенеративна медицина, клетка и ген терапија (CGT), молекуларна спонџова улога и RNA аптамер.
Процес | Опционална Услуга | Детали за услугата | Период за достава (Ден) |
дизајн и оптимизација на секвенца на circRNA | Дизајн и оптимизација на кодирачките секвенци | Оптимизација на CDS кодони | 1 |
Дизајн и оптимизација на не-кодирачki секвенци | Дизајн и оптимизација на интрон и ексон секвенци, хомологични рака и спейсер | 1-2 | |
Припрема на циркуларен плазмид | Синтеза на ген | Синтеза на ген (Трећа страна) | 7-10 |
Амплификација на плазмид | Амплификација на плазмид | 2 | |
Екстракција на плазмид | |||
Припрема на линеаризиран плазмид | Линеаризација и чистење на плазмид | Линеаризација на плазмид | 1 |
Чистење на ДНК при линеаризација | |||
Транскрипција во тестерот и цикланизација | Транскрипција во тестерот и цикланизација | Реакции на Ин Витро Транскрипција и Циклирање | 1-2 |
Дигестација со RNase R | |||
Оптимизација - опционално | Состав на Реакцијата, Оптимизација на Времетраењето | 2-5 | |
чистење на circRNA | Традиционален Метод за Чистење | Преципитација со хлорид на литиум | 1 |
Чистење со магнетски жички | 1 | ||
Високочисто circRNA Чистење | Припаративна Високо Ефикасна Жидка Хроматографија (HPLC) | 1-2 | |
Замена на буфер | Ультрафилтрирање | 1 | |
лиофилезација на circRNA | Пополнување на Проби | Исполнител | 2-3 |
Лиофилезација | Претходно замразување | ||
Првично исушување (сублимација) | |||
Вторично исушување (десорбција) | |||
circRNA-LNP Енкапсулирање | Енкапсулација LNP | Предтрење на Материјали и Течности | 2 |
Микрофлуидно Уредство за Мешање | |||
Замена на буфер | Тангенцијална протечна филтрирање | 1 | |
Стерилни | Филтрирање | ||
Контрола на Квалитетот на Плазмидната ДНК | Концентрација/чистота | Ултравиолет (UV) спектрофотометрија | 1-2 |
Плаzmид конформација | Агарозна гел електрофореза (AGE) | ||
Капиларна електрофореза (CE)-Опционално | |||
Плаzmид идентификација | Идентификација со ограничувачки ензими/AGE | ||
Контрола на квалитетот на circRNA | Концентрација/чистота | Ултравиолет (UV) спектрофотометрија | - |
Чистота | Агарозна гел електрофореза (AGE)/E-Gel | 0.5 | |
ХPLC-опционално | 1 | ||
Контрола на Квалитетот за circRNA-LNP | Ефикасност на енкапсулирање | Рибо กรีн Метод | 1 |
Големина на честичките | Динамичко Светлинско Развијување (DLS) | 1 | |
Индекс на Полидисперзивност | Динамичко Светлинско Развијување (DLS) | 1 | |
Зета Потенцијал | Динамичко Светлинско Развијување (DLS) | 1 | |
Асај за Ефикасност Базиран на Ћелии | Трансфекција на Ћелии | Поставување на ћелии, трансфекција на ћелии | 4 |
Детекција на Целна Протеин | Набљудување на флуоресцентност, Западен блот/ЕЛИСА | 1-3 |
Трансфирнирали егзоген зелен флуоресцентен белчестин циркулар РНК (eGFP циркулар РНК), mЧерен циркулар РНК, луцифераза циркулар РНК во 293T клетки и ги детектувавме целните белчини преку флуоресцентен, светлинен или бојен сигнал, западен блот (ЗБ), ензим-линкувани имунноасорбентен тест (ЕЛИСА).
Асанси на потенци на циркуларни РНК примероци од Yaohai Bio-Pharma