Профилирањето на N-гликаните е од суштинско значење за производство на биофармацевтски препарати. Yaohai Bio-Pharma обезбедува услуга за профилирање на N-гликан користејќи Течна хроматографија-масна спектрометрија (LC-MS) на ослободени и означени гликани. Општите чекори за подготовка на примерок од N-гликани вклучуваат дигестија на гликопротеинот (GP), де-гликозилација, прочистување, означување/дериватизација и екстракција на цврста фаза (SPE).
Вклучени сме во протеинската структурна карактеристика на различни големи молекули, вклучувајќи вакцини за рекомбинантна подединица, нанотела/VHHs/ Антитела со еден домен (sdAbs), фрагменти на антитела, хормони/пептиди, цитокини, фактори за раст (GF), ензими, итн.
Регулаторни барања за профилирање на Н-гликан
Според упатствата на ICH Q6B, „за гликопротеините, се одредува содржината на јаглени хидрати (неутрални шеќери, амино шеќери и сиалични киселини). Дополнително, структурата на синџирите на јаглени хидрати, шемата на олигосахаридите (антенарниот профил) и местото(ите) на гликозилација на полипептидниот синџир се анализираат колку што е можно.
Аналитички метод
| Анализа |
Методи |
| Н-гликанско профилирање |
Течна хроматографија-масовна спектрометрија (LC-MS) анализа на ослободени и означени гликани |
Процедури
1. Ензимско ослободување на гликан со пептид N-гликозидаза F (PNGаза F)
2. Дериватизација на ослободените гликани со 2-аминобензамид (2-AB)
3. Прочистување на собраните N-гликани на колона TSK Amide - 80 доколку се присутни големи количества детергенти, неиспарливи соли или материјали со слободни амино групи
4. Означување со флуоресцентен 2-аминобензамид (2-AB)
5. LC-MS анализа на означени N-гликани
6. Анализа на податоци
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
