При рекомбинантните протеини често се случува оксидација на отворените странични ланци на аминокиселините, како што се триптофан (Trp) и метионин (Met), што променува физичките и хемиски карактеристики на протеините. Овие промени можат да доведат до промена во биолошките функции на засегнатите протеини, како што е губење на врска, намалување на ензимска активност, неочекувано брзо исчезнување. Протеините се важни цели за оксидентни реакции бидејќи реагираат брзо со оксидентите и се обилни во ќелијите, екстрацелуларните ткива и телесните течности.
Затоа, надгледувањето на протеинската оксидација е критично за успешното развојно на биофармацевтички производи.
Yaohai Bio-Pharma нуди анализа на оксидација на аминокиселини, која ви овозможува да определите оксидацијата на аминокиселините со Ликвидна Хроматографија-Маса Спектрометрија (LC-MS).
Бевме вклучени во карактеризација на структурата на протеини на различни големи молекули, вклучително Рекомбинантни Субјектни Вакцини, Нанотела / VHHs / Еднодоменски антитела (sdAbs), Одрески Фрагменти, Хормони/Пептиди, Цитокини, Расти Factors (GF), Ензими, Колагени итн.
Регулаторни Заhtеви за Оксидација на Аминокиселини
Според насоките ICH Q6B, оксидирани форми можат да се засечат и карактеризираат со хроматографски, електрофоретски и/или други релевантни аналитички методи (нпр., Високо Performансна Жидна Хроматографија (HPLC), капиларна електрофореза, масовна спектроскопија, циркуларна диходромија).
Аналитички методи
| Анализа |
Методи |
| Оксидација на аминокиселини |
LC-MS, Реверзно-Фазна Високо Performансна Жидна Хроматографија (RP-HPLC) или Хидрофобна Интеракција Хроматографија Високо Performансна Жидна Хроматографија (HIC-HPLC) и масовна спектроскопија |
Аналитички Процедури
1. Припрема на примероци
2. LC-MS
3. Анализа на податоци
Резидуите од триптофан (Trp) се особено склони кон окислување поради високата реактивност на ароматичниот индол со реактивните врски на кислород. Окислувањето на Trp захтева некое изложување на Trp резидуите кои обично се прикривени во тродимензионалната структура на белчината.
Меѓутоа, кога Trp резидуите се окиснати, тие можат да се претворат во разновидни производи со многу различни својства од почетниот Trp. Најчест патека за окислување на Trp вклучува формирање на N-формилкинурин (Разлика во маса: +32).
Друг аминокиселина што често се окиснува е метионината. Сулфур атомот во Met резидуумот може да прима или еден или два кислородни атоми што води до формирање на сулфоксид (Разлика во маса: +16) или сулфон (Разлика во маса: +32), одговарно. Оваа модификација е relatивно честа поради обично високата површинска експозиција на Met.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
