Развој на низводно процес

Микробен CDMO

Развој на низводно процес

Значењето на развојот на надолниот процес (DSP).

Целата супа за ферментација содржи целен протеин или плазмид, како и нечистотии поврзани со производот и процесот, на пр., агрегати, супстрати на микробни клетки, протеини од клетките домаќини (HCP), ДНК на клетките домаќини (HCD), ендотоксин и антибиотици.

Затоа, важно е да се дизајнира ефикасен DSP, процес на прочистување, да се отстранат одредени нечистотии и да се произведе високо прочистена и висококвалитетна дрога супстанција. Дополнително, оптимизацијата на процесот на прочистување може да помогне да се зголеми обновувањето на производот, да се намалат трошоците и да се подобри приспособливоста и репродуктивноста на процесот.

Клучни зборови: развој на процес, оптимизација и валидација, процес на прочистување, хроматографија, елиминација на нечистотии, отстранување на HCP, елиминација на HCD, отстранување на ендотоксин, денатурација и превиткување на протеини, склопување на VLP, конјугација

Апликација: Биофармацевтска индустрија, човечка медицина, медицина за животни, вакцина, рекомбинантна биологија со големи молекули, рекомбинантна биологија, биолошки реагенс

DSP решенија на Јаохаи Био-Фарма

Имаме големо искуство со изолирање на целните протеини или плазмиди од сложени матрици преку развивање и оптимизирање на низводниот процес на прочистување. Постојат различни типови на единечни операции погодни за прочистување на биолошките средства, вклучувајќи центрифугирање, филтрација, хомогенизација, алкална лиза, ултрафилтрација, таложење, денатурација и превиткување на протеини, хроматографија итн.

Нашите достапни услуги за развој на прочистување вклучуваат:

Развој на целиот процес на прочистување од собирање на клетки или супернатант до финалната активна состојка.
Оптимизација на процесот на прочистување врз основа на нечистотии поврзани со производот и процесот за да се зголеми квалитетот и безбедноста на производот, на пр., HCP, HCD, ендотоксин.
Дефиниција и оптимизација на клучните параметри во една или неколку операции на единици, вклучувајќи лиза на клетки, филтрација на тангенцијален проток, скрининг на смола, хроматографија, денатурација и превиткување на протеини итн.
Оптимизација на процесот во смисла на квалитет, принос, обновување, цена и приспособливост.
Валидација на низводниот процес на прочистување.
Проценка на опсегот на параметрите заснована на ризик и дизајн на експерименти (DoE) при моделирање на процеси.

Детали за услугата

Стандардизираните платформи за прочистување на протеини или плазмиди се засноваат на повеќекратни чекори на сурово прочистување и помалку од 4 чекори на хроматографија, вклучувајќи фаќање, средно прочистување и полирање.

Детали за услугата	Операции на единицата	параметри
Сурово прочистување	Центрифугирање	Брзина на ротација, време
	Хомогенизација под висок притисок	Вкупна цврста содржина, притисок, циклуси
	Континуирана алкална лиза	Односот на повторно суспендирани клетки со раствор на лиза, време на лиза
	Филтрација на тангенцијален проток	Материјал на мембраната и големина на пора, брзина на довод на трансмембрански притисок (TMP), сооднос волумен на филтрација и површина на мембраната
	Врнежите	Тип и концентрација на преципитант, адитив, pH, температура, време
Денатурација и превиткување	Инклузивно растворување на протеини во телото	Концентрација на денатурант (на пр., уреа, гванидин HCl, силен јонски детергент), детергенти (на пр., натриум додецил сулфат, СДС), агенси за намалување (на пример, дитиотреитол, ДТТ), агенси за хелати (етилендиамин тетраоцетна киселина, EDTA), температура,
Денатурација и превиткување	Преклопување на протеини	Методи на превиткување (разредување, дијализа или SEC превиткување), концентрации на протеини, пуфери, pH, температура, време, оксидирачки и редуцирачки агенси (на пр., глутатион, GSH/оксидиран глутатион, GSSH, DTT/GSSH, цистеин/цистинка), адитиви (L-аргинин, уреа, гванидин/HCl и детергенти)
Фаќање, средно прочистување и полирање	AC (афинитетна хроматографија)	Неколку типови на смола/колона за хроматографија (на пр. AC, IEX, HIC, SEC, RPC, MMC), Должина и дијаметар на колоната, Состав на бафер, Волумен на инјектирање, Состав на мобилна фаза (адсорпција и десорпција), pH, брзина на проток, врзување, Перење и услови за елуција.
	IEX (анјонска или катјонска размена на хроматографија)
	HIC (хидрофобна интеракциска хроматографија)
	Десолење и/или хроматографија со исклучување на големината (SEC)
	RPC (Хроматографија со обратна фаза)
	MMC, хроматографија со мешан режим

студија на случај

Случај 1

Нарачани сме да го развиеме и оптимизираме процесот на прочистување низводно за да ја зголемиме чистотата на протеините од 85% на 90% додека ги намалуваме чекорите на хроматографијата.

Јаохаи испорача робустен и скалабилен процес на прочистување со 3 чекори на хроматографија за целниот протеин, бактериска алергија. И конечната чистота достигна 95%.

Случај 2

Yaohai беше назначен од нашиот клиент за да го оптимизира процесот на отстранување на ендотоксинот на вакцината за честички слични на вирусот (VLP).

Нашиот тим изврши оптимизација на параметрите на хроматографијата и подготви лек супстанција со чистота од 98% и остаток на ендотоксин од 12.8EU/mg.

Нашите искуства

Ние сме вклучени во развојот и производството на различни големи молекули, вклучувајќи вакцини за рекомбинантна подединица, VLPs, хормони (инсулин, GLP-1, хормон за раст), цитокини (Интерлеукин-2/IL-2, IL-15, IL-21 ), фактори на раст (EGF, FGF, NGF), нанотела/антитела од еден домен (sdAbs), ензими итн.

опрема

Ги користиме водечките во индустријата AKTA Pure, AKTA Avant и Preparative HPLC системи за изведба на различни методи на хроматографија вклучувајќи афинитет, јонска размена, хидрофобна интеракција, обратна фаза и хроматографија со исклучување на големината.

сите категории

Развој на низводно процес

Микробен CDMO