Синтеза на mRNA во vitro
Главните компоненти на mRNA се 5’-cap, 5’-UTR, отворен читачки рамак (ORF), 3’-UTR и 5’ поли A хвост, кои се неопходни за одржување на функцијата на mRNA. Истражувачите ги идентификувале и оптимизирале различни методи за mRNA секвенци и структури.
Синтезата на mRNA се изведува со користење на линеарни DNA темплети, RNA полимерази (T3, T7 или SP6), немодифицирани или модифицирани нуклеотиди, ензими и одговарачки реактиви во vitro транскрипција (IVT).
модификација на 5’ Cap
Последователностите на зрејот mRNA од еукариотски ќелија покажуваат 7-метилгванозин (m7G) кап на 5' крај, што подобрува стабилноста и ефикасноста на преводот на mRNA. Постојат два општи начини за фиксирање на mRNA во vitro. Прво, mRNA може да биде капирана заедно со транскрипцијата во vitro со додавање на кап аналог на m7GpppG структура (нпр., CleanCap) во системот за IVT. Овој ко-транскрипцион метод на капирање обезбедува природна 5' капова структура и зголемува ефикасноста на капирањето до скоро 90-99%. Во втор ред, карта на mRNA може да се изврши и со ензимска реакција след транскрипцијата во vitro.
PolyA Модификација
Поли(A) хвост исто така ја продожува полу животот на мРНК во живо и подобрува ефикасноста на превод на мРНК. Должината на амплификованите поли(A) хвости треба да биде 100-300 нуклеотиди. Дополнително, модифицираното аденин зголемува стабилноста на поли A хвост спротив келјските РНазе деградација. Поли A хвост може да се вметне со ин vitro транскрипција користејќи ДНК темплат кој содржи поли A, што резултира во специфична должина на поли A секвенца. Рекомбинантна поли A полимераза исто така може да се користи со ензимска полиаденилација по транскрипцијата на мРНК.
Модификација на Нуклеотидите
Променетите нуклеозиди можат да го спречат распознавањето и/или активацијата на рецепторите за распознавање на образци (PRR) и да зголемат ефикасноста на вакцините mRNA по два суштински различни начини. Додavanjето на одредени хемиски променети нуклеозиди, вклучувајќи псеудоуридин (ψ), 1-метилпсеудоуридин (m1ψ), тиоуридин (s4U) и 5-метилцитозин (m5C) може да предотвратат активацијата на TLR7/8 и други имунолошки рецептори, што значително ја намалува имуногеноста на mRNA.
систем за доставување на mRNA
За да се одржи функцијата на mRNA, треба да влезе во цитоплазмот на домаќина и да изрази специфични антигени. Еден од најтешките предизвици пред mRNA вакцини и терапии е доставувањето на mRNA во целевите клетки со доволно високи нивоа на транслација, што бара многу специфични и ефикасни системи за доставување на mRNA. Се развијаат и користат неколку вектори за доставување на mRNA, вклучувајќи дендритни клетки (DCs), протамин, катионски полимери и катионски липозами.
Комплексите од катионски липиди со mRNA и други припремки можат да формираат наночестици со големина помеѓу 80-200 нм, кои се нарекуваат липидни наночестици (LNPs). Како еден од најнапредните системи за пренос на mRNA, LNP вклучува ионизабилни катионски липиди, природни фосфолипиди, холестерол и полиетилен гликол (PEG). Неколку RNA вакцини и терапии (siRNA и mRNA), кои се одобрени од страна на Американската агенција за храна и лекови, се bazirani na LNP системи за пренос.
Yaohai Bio-Pharma Нуди Комплетна Решија за RNA
|
Каталозни RNA производи
- Каталог mRNA производи
- Каталог saRNA производи
- Каталог circRNA производи
|
Порачка синтеза на RNA
- Порачка синтеза на mRNA
- Порачка синтеза на saRNA
- Порачка синтеза на circRNA
|
услуги mRNA CDMO
- Разработка на процес
- GMP Производство
- Асептично наполнување и завршување
- Аналитички анализи и тестови
|
Порачки Достапни Резултати
|
Ранг
|
Доставни резултати
|
Спецификација
|
Апликации
|
|
non-GMP
|
Активна Фармацеутска Супстанција, mRNA
|
0.1~10 mg (mRNA)
|
Препреклинска истражувања како што се трансфекција на ќелии, Развој на аналитички методи, Престабилни студии, Развој на формулација
|
|
Лекарски производ, LNP-mRNA
|
|
GMP, Стерилност
|
Активна Фармацеутска Супстанција, mRNA
|
10 мг~70 г
|
Истражувачко ново лекарство (IND), Ауторизација за клинички испитувања (CTA), Опрема за клинички испитувања, Пријава за лиценца за биолошки производи (BLA), Комерцијална опрема
|
|
Лекарски производ, LNP-mRNA
|
5000 боцички или предискусираните сiringи/картриџи
|
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
