Рекомбинантен Ензим за Терапевтична Употреба
Терапевтичките ензими кои се добиваат преку биотехнологски процеси се шiroко користат за многу клинички апликации, вклучувајќи терапија со замена на ензими, деградација на накопирани метаболити и токсини, лечење на рак и генетска едитирање. Неколку терапевтички ензими можат да се произведат во микробијален систем за изразување.
Рекомбинантен ензим како материјал
Постојат неколку ензими кои се користат во производството на долг RNA (нпр., mRNA, saRNA, circRNA), производството на антитела–лек конјугати (ADCs) и други. Ензимите произведени од микроби се повеќе косметички ефикасни од оние произведени од млекопитачки клетки, особено системот за израз на E. coli.
|
Апликација
|
Ензими
|
Функција
|
|
Ензими за линеарно производство на RNA, без RNase
|
Рестрикциони ендонуклеази
|
Линеаризација на плазмидна DNA (pDNA) за да се избегне создавање на подолги транскрипти.
|
|
T7 RNA полимераза (T7 RNAP)
|
Се биндуваат на T7 промотор и генерираат специфичен RNA транскрипт; Играат клучна улога во реакцијата на ин vitro транскрипција (IVT).
|
|
Вакцинеен капајушен ензим
|
Додадете Кап структури на 5′ краевите на мРНК од IVT.
|
|
Пирофосфатаза, инорганична (iPPase)
|
Превентирајте пирофосфат токму по време на реакцијата IVT.
|
|
Инхибитор на РНазе, рекомбинантен
|
Инхибирајте активноста на РНазе токму по време на реакцијата IVT.
|
|
ДНазе I
|
Избришете ДНК шаблонот.
|
|
Ензим за производство на циркуларна РНК, без РНазе
|
РНазе R
|
Разградува линеарното РНК и обогатува циркуларното РНК.
|
|
Ензим-медиирана гликозација
|
Пептид-N-гликосидаза (PNGase F)
|
Пресекува амидниот врскок помеѓу првата сладоледна молекула GlcNAc и бочната ланка на Asn297; Ослободува гликози од антителата IgG.
|
|
Бактеријална трансглутаминаза (BTG)
|
Конjugира натовара точечно за да се креираат АДЦ-и.
|
|
Сортаза A
|
Катализира спојувањето на протеините.
|
|
β1,4-галактозидаза
|
Ослободува сите терминални галактози и формира хомоген G0 изоформ на антителото.
|
|
β1,4-галактозилтрансфераза (Gal-T)
|
Пренеси шеќерен остаток со хемиски реактивна функционална grupa.
|
|
α2,6-сиелилтрансфераза (Sial T)
|
Инкорпорирај терминални сиалични киселини во природната гликанска структура на антителот.
|
|
Ензимска реорганизација на гликаните и гликоинжењеринг
|
Ендогалактозаминидаза (ENGase)
|
Хидролизирајте β1,4-гlicosidic врска меѓу GlcNAcβ1–4GlcNAc на N-гликаните; Избриши N-врзани гликани во регионот Fc на IgG антитела.
|
|
Ендогликозидаза S (EndoS)
|
|
|
Гликозилтрансферази (GTs)
|
Пренеси N-гликан оксазолин на дефукозилтирани IgGs.
|
|
Други
|
Ензими произведени од микробна џиба
|
Прилагодена потреба
|
Рекомбинантен ензим како реагент
Протеази за отстранување на ознаки
Фузионите ознаки често се користат за подобрување на растворливоста и стабилноста на рекомбинантните протеини на интерес и да ги направат лесни за чистење. Најчесто користените ознаки вклучуваат His-ознака, малитозно-врскувачки протеин (MBP), глутатион-s-трансфераза (GST) итн.
Обично, линкер секвенција се додава помеѓу фузионата ознака и целевата протеинска секвенција за отстранување на ознаката. Отстранувањето на фузионите ознаки бара протеази со сайтово-специфичен дејство, како што се ентерокиназа (EK), тромбин, протеаза на табаковата ритка вируска болест (TEVp), хуман риновирус протеаза 3C (HRV3C), мал протеин со убивачко деловање (SUMO) протеаза, протеаза на табаковата венчана вируска болест (TVMV) и карбоксипептидаза A/B (CPA/CPB).
|
Вид
|
Ензими
|
Сајтово за препознавање
|
|
Протеази за отстранување на ознаки
|
Ентерокиназа (EK), ентеропептидаза
|
DDDDK↓
|
|
тромбин
|
LVPR↓GS
|
|
Протеаза TEV
|
ENLYFQ↓G
|
|
Протеаза HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
|
Протеаза SUMO
|
Терцирна структура на SUMO
|
|
Протеаза TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
|
Екзопротеази за отстранување на тагови
|
Карбоксипептидаза A (CPA)
|
C-терминални аминокиселини, освен Про, Лиз и Арг
|
|
Карбоксипептидаза B (CPB)
|
C-терминални Лиз и Арг
|
Други протеази, нуклеази и амидази
|
Апликација
|
Ензими
|
Функција
|
|
Други протеази
|
Протеаза K
|
Серинска протеаза што ги раствара белчините преку хидролизата на пептидните врски.
|
|
ИдеS, IgG протеаза
|
Ензими што деградираат IgG (Ides) кои секуваат на специфичен локус на имуноглобулинот G (IgG), генерирајќи Fab и Fc фрагменти
|
|
ИгА1 протеаза
|
Протеолитички ензим кој секува на специфичен локус во секвенцата на врвниот регион на човечкиот имуноглобулин А1 (ИгА1).
|
|
Нуклеаза
|
Нуклеаза
|
Секува нуклеински киселини (ДНК или РНК) преку хидролиза на фосфодиестерските врски.
|
|
Рестрикциона ензим
|
Ендопротеаза која секува ДНК при или близо до специфични локуси.
|
|
Амидаза
|
PNGase F
|
Секува помеѓу внатрешниот најблиски N-акетилглукозамин (GlcNAc) и аспарагин резидуумите на високоманозните, хибридните и комплексните олигосахариди.
|
Yaohai Bio-Pharma Нуди Интегрално Решение за CDMO за Рекомбинантни Ензими
Референца:
[1] Hennigan JN, Lynch MD. Прошлото, сегашноста и бидоговето на терапиите bazirani na ензими. Drug Discov Today. 2022 Jan;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
