Analyse |
Méthodes |
Poids moléculaire |
Chromatographie en Phase Liquide-Spectrométrie de Masse (LC-MS) / Chromatographie en Phase Liquide/Spectrométrie de Masse par Ionisation par Pulvérisation Électrospray (LC/ES-MS) de protéines intactes, réduites et N-déglycosylées |
Analyse des variants de taille |
LC-MS, Chromatographie par Exclusion de Taille-Spectrométrie de Masse (SEC-MS), Diffusion de la Lumière Dynamique (DLS), Ultracentrifugation Analytique (AUC), Chromatographie par Exclusion de Taille-Diffraction de la Lumière à Plusieurs Angles (SEC-MALS) |
Analyse des variants de charge |
LC-MS, Chromatographie par Échange Ionique-Spectrométrie de Masse (IEX-MS) |
Stabilité thermique (Tm) |
Calorimètre à balayage différentiel (DSC) |
Coefficient d'Extinction |
Analyseurs d'acides aminés |
Cartographie des peptides |
LC-MS après digestion par une protéase |
Couverture séquentielle des protéines |
LC-MS après une à trois digestions |
Séquençage en Terminus N |
LC-MS après digestion, déterminée par la cartographie des peptides ou la dégradation d'Edman |
Séquençage terminal C |
LC-MS Après digestion |
Liens disulfure |
LC-MS Après digestion |
Groupes sulfhydryle libres |
Test d'Ellman |
Oxydation des Acides Aminés |
LC-MS, Chromatographie en phase inverse à haute performance (RP-HPLC) ou Chromatographie d'interaction hydrophobe-Haut rendement (HIC-HPLC) et spectrométrie de masse (MS) |
Isomérisation des Acides Aminés |
LC-MS après clivage enzymatique |
Déamidation |
LC-MS après clivage enzymatique |
Modification du terminus N |
LC-MS Après digestion |
Modification du terminus C |
LC-MS Après digestion |
Élimination du lysine en position C-terminale |
LC-MS Après digestion |
Profilage des N-glycanes |
LC-MS des glycanes libérés |
Site de N-Glycosylation |
LC-MS après clivage enzymatique |
Occupation du Site de N-glycosylation |
LC-MS après digestion par déglycosidase et protéase (trypsine ou Asp-N) |
Structure d'Ordre Supérieur |
Dichroïsme circulaire (CD) Spectromètre infrarouge (IR) |