l'ARNm est largement utilisé dans l'étude des fonctions des gènes ou des protéines. Il est également courant dans le développement de biologiques préventifs et thérapeutiques. En tant que stratégie de synthèse courante pour les molécules d'ARN, la transcription in vitro (TIV) nous permet d'obtenir des transcrits personnalisés efficacement.
Yaohai Bio-Pharma a établi un ensemble de technologies de synthèse d'ARNm pour fournir un ARN de haute qualité, tel que la conception et l'optimisation des séquences, la TIV, la purification, la lyophilisation et l'encapsulation dans des nanoparticules lipidiques (LNP). Tous les produits sont libérés selon des normes strictes de contrôle qualité (QC).
Avec l'épidémie de la pandémie de COVID-19 en 2020, la technologie d'ARNm a progressé à grands pas, et ses recherches et applications connexes ont connu un développement sans précédent, y compris les vaccins préventifs contre les maladies infectieuses, les vaccins thérapeutiques et médicaments en cancérologie, la thérapie tumorale, la thérapie de remplacement de protéines, la médecine régénérative et la thérapie cellulaire et génique (CGT).
vaccin à ARN messager | thérapies à base d'ARNm |
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Process | Service optionnel | Détails du service | Période de livraison (jour ouvrable) | Résultat attendu |
conception et optimisation de la séquence d'ARNm | Conception et optimisation des séquences codantes | Conception de séquences CDS et optimisation des codons | 1-3 | Fichier de séquence |
Conception et optimisation des séquences non codantes | Conception et optimisation des UTR, séquences polyA | |||
Préparation du plasmide modèle de transcription | Préparation de plasmide recombinant | Synthèse de gènes | 7-10 | |
Amplification et extraction de plasmides | 4 | |||
Linéarisation et purification des plasmides | ||||
transcription in vitro de l'ARNm | Mise en chapeau co-transcriptionnelle (méthode en un pas) | Transcription in vitro (IVT) / Analogue de cap | 1-2 | N/A |
Modifications des nucléotides (modifications UTP/CTP) | ||||
Élimination du modèle d'ADN (DNase I) | ||||
Cappage enzymatique (procédé en deux étapes) | IVT | 2-3 | ||
Modifications des nucléotides (modifications UTP/CTP) | ||||
Élimination du modèle d'ADN (DNase I) | ||||
purification de l'ARNm (précipitation au chlorure de lithium/boules magnétiques) | ||||
Cappage enzymatique | ||||
purification de l'ARNm | Schéma de purification conventionnel | Précipitation au chlorure de lithium | 1 | substance médicinale ARNm |
Purification par boules magnétiques | ||||
Schéma de purification par colonne chromatographique | Combinaison de plusieurs méthodes de chromatographie | 1-2 | ||
Échange de tampon | Ultrafiltration | 1 | ||
lyophilisation de l'ARNm | Lyophilisation | Précongélation | 2-3 | poudre lyophilisée d'ARNm |
Séchage primaire (soufflimation) | ||||
Séchage secondaire (désorption) | ||||
encapsulation d'ARNm | Encapsulation en LNP | Encapsulation en LNP | 2-3 | produit pharmaceutique ARNm-LNP |
Concentration et échange de tampon | ||||
analyse de la qualité de l'ARNm | substance médicinale ARNm / poudre lyophilisée | Concentration, pureté | 1 | Rapport d'essai |
Intégrité, efficacité du capping, distribution de la queue polyA | 2-5 | |||
produit médicinal ARNm-LNP | Efficacité d'encapsulation | 1 | ||
Taille et distribution des particules | ||||
Charge de surface | ||||
validation de l'expression de l'ARNm | évaluation des cellules 293T | Mise en culture cellulaire | 4 | |
Transfection transitoire des cellules | ||||
Observation du signal de fluorescence | 1-3 | |||
Western blot (WB) / Analyse par enzyme-liée immuno-sorbent (ELISA) |
5' Cap |
▪ Non chapturé ▪ Cap0, co-chapturé ▪ Cap1, co-chapturé ▪ Cap1, chaptage enzymatique |
5’ UTR/3’ UTR |
▪ Séquence UTR naturelle ▪ Séquence UTR mutante/ingénierée |
queue polyA 3' |
▪ Queue de 100A ~120A (recommandée) ▪ Queue polyA segmentée ▪ Autres queues personnalisées |
Nucléosides modifiés |
▪ Bases non modifiées ▪ Pseudouridine (Ψ) ▪ N1-Méthylpseudouridine (N1Ψ) ▪ 5-méthylcytosine (m5C) ▪ 5-méthyluridine (m5U) ▪ 5-méthoxyuridine (5moU) ▪ 2-thioridine (s2U) ▪ 2′-O-méthyl-U ▪ Autres modifications |
Flux de service intégré
Offre une série de services allant de la conception des séquences en amont à la préparation de l'ARNm, au contrôle qualité et à la validation de l'expression en aval.
Conception et optimisation de séquences à la pointe de l'innovation internationale
La conception et l'optimisation professionnelles de séquences d'ARNm facilitent une expression efficace de l'ARNm.
Modifications nucléotidiques diversifiées
Augmenter efficacement l'expression de l'ARNm et réduire les réponses immunitaires indésirables de l'ARNm.
Plateforme de purification mature
En combinant une méthode de purification conventionnelle et conçue sur mesure, des échantillons d'ARNm sont obtenus avec une haute pureté.
Plateforme QC complète
Élargir les options de contrôle qualité pour répondre aux exigences des tests courants, tels que la concentration, la pureté A260/280 et l'intégrité, ainsi qu'aux exigences de haut niveau de contrôle qualité, telles que l'efficacité du cappage/distribution polyA.
Livraison rapide
L'ARNm personnalisé peut être livré en seulement 7 jours, à l'exception de la synthèse externe des séquences.