La préparation de CircRNA nécessite un ARN linéaire comme matériau précurseur (ARN précurseur) pour la cyclisation, où l'ARN précurseur est généralement préparé à l'aide d'un ADN plasmidique linéarisé comme modèle de transcription et transcrit in vitro avec l'aide de la polymérase T7 RNA.
Un ADN plasmidique de haute qualité est essentiel pour la transcription in vitro (IVT). Sur la base de la plateforme de service mature de préparation de plasmides, Yaohai Bio-Pharma peut fournir un service de préparation d'ADN plasmidique linéaire purifié et standardisé (pDNA) pour garantir l'intégrité des produits IVT.
Détails des Services
| Process |
Service optionnel |
Détails du service |
Période de livraison (jour ouvrable) |
| Préparation de plasmides circulaires |
Synthèse de gènes |
Synthèse de gène (tierce partie) |
7-10 |
| Amplification de plasmide |
Amplification de plasmide |
2 |
| Extraction de plasmide |
| Préparation de plasmide linéarisé |
Linéarisation et purification des plasmides |
Linéarisation du plasmide |
1 |
| Purification de l'ADN linéarisé |
| Contrôle qualité de l'ADN de plasmide |
Concentration et pureté |
Spectrophotométrie Ultraviolette (UV) |
1-2 |
| Conformation du plasmide |
Électrophorèse sur gel d'agarose (AGE) |
| Électrophorèse capillaire (CE) - Optionnel |
| Identification du plasmide |
Identification d'enzyme de restriction/AGE |
Nos fonctionnalités
- Modèle de Plasmide Freecut
Sélection flexible des méthodes de linéarisation
- Taux de récupération élevé
Optimisation des méthodes d'extraction et de purification d'ADN pour obtenir des taux de récupération élevés.
Normes strictes de contrôle des processus, avec un taux de conformation superhélicée des échantillons de plasmides de recherche supérieur à 80 %.
- Processus de Plateforme Mature
Services de préparation et de contrôle qualité de plasmides de haut niveau et haute efficacité pour répondre aux besoins expérimentaux.
Étude de cas
En prenant l'exemple du produit mCherry circRNA de Yaohai Bio-Pharma, le pourcentage de superbobines des échantillons de plasmides modèles de transcription (niveau de recherche) est supérieur à 70 %, avec un taux de linéarisation proche de 100 %.
le mCherry circRNA est préparé à partir d'un plasmide linéarisé comme modèle et transféré dans les cellules 293T. Un niveau élevé d'expression de fluorescence (fluorescence rouge) est détecté après 24 heures de transfection, ce qui sera renforcé après 48 heures, et peut encore être détecté le 7ème jour et le 14ème jour après la transfection.
la protéine mCherry est exprimée de manière stable et efficace, et la pureté du modèle transcriptionnel peut répondre aux exigences du produit pharmaceutique circRNA de haute qualité.
Validation de l'expression in vitro du mCherry circRNA
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ET
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TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
