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Synthèse sur mesure de circRNA

Synthèse sur mesure de circRNA

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Synthèse sur mesure de circRNA

Le ARN circulaire (circRNA) est largement utilisé dans l'étude des fonctions des gènes ou des protéines. Il est également populaire dans le développement de produits biologiques préventifs et thérapeutiques, de manière similaire à l'ARNm.

Yaohai Bio-Pharma a mis au point un ensemble de technologies de synthèse de circRNA pour fournir un ARN de haute qualité, tel que la conception et l'optimisation des séquences, la transcription in vitro (IVT), la circularisation/cyclisation, la purification et l'encapsulation dans des nanoparticules lipidiques (LNP). Tous les produits sont libérés selon des normes strictes de contrôle qualité (QC).

Applications du circRNA

En comparaison avec l'ARNm linéaire, l'ARN circulaire (circRNA) est plus stable sur le plan structurel et constitue un principal point chaud dans les recherches actuelles sur les médicaments à acide nucléique. Il présente des applications variées dans différents domaines, qu'il s'agisse d'ARN circulaire codant ou non codant, y compris les vaccins préventifs contre les maladies infectieuses, les vaccins thérapeutiques en oncologie, les médicaments thérapeutiques en oncologie, la thérapie de remplacement de protéines, la médecine régénérative, la thérapie cellulaire et génique (CGT), le rôle de sponge moléculaire et les aptamères ARN.

Détails du service
Process Service optionnel Détails du service Période de livraison (Jour)
conception et optimisation de séquences circRNA Conception et optimisation des séquences codantes Optimisation des codons CDS 1
Conception et optimisation des séquences non codantes Conception et optimisation des séquences d'introns et d'exons, des bras homologues et des espacements 1-2
Préparation de plasmides circulaires Synthèse de gènes Synthèse de gène (tierce partie) 7-10
Amplification de plasmide Amplification de plasmide 2
Extraction de plasmide
Préparation de plasmide linéarisé Linéarisation et purification des plasmides Linéarisation du plasmide 1
Purification de l'ADN linéarisé
Transcription in vitro et cyclisation Transcription in vitro et cyclisation Réactions de transcription in vitro et de cyclisation 1-2
Digestion par la RNase R
Optimisation - optionnelle Composition de la réaction, optimisation du temps 2-5
purification du circRNA Méthode de purification conventionnelle Précipitation au chlorure de lithium 1
Purification par boules magnétiques 1
Purification très pure de l'ARN circulaire Chromatographie liquide à haute performance préparative (HPLC) 1-2
Échange de tampon Ultrafiltration 1
lyophilisation du circRNA Remplissage d'échantillon Remplissage 2-3
Lyophilisation Précongélation
Séchage primaire (soufflimation)
Séchage secondaire (désorption)
encapsulation circRNA-LNP Encapsulation en LNP Prétraitement des matériaux et liquides 2
Mélange par dispositif microfluidique
Échange de tampon Filtration par flux tangentiel 1
Stérilisé Filtration
Contrôle qualité de l'ADN plasmidique Concentration/conformité Spectrophotométrie Ultraviolette (UV) 1-2
Conformation du plasmide Électrophorèse sur gel d'agarose (AGE)
Électrophorèse capillaire (CE) - Optionnel
Identification du plasmide Identification de l'enzyme de restriction/AGE
Contrôle qualité du circRNA Concentration/conformité Spectrophotométrie Ultraviolette (UV) -
Pureté Électrophorèse sur gel d'agarose (AGE)/E-Gel 0.5
HPLC - optionnel 1
Contrôle qualité du circRNA-LNP Efficacité d'encapsulation Méthode RiboGreen 1
Taille de la particule Dispersion de la lumière dynamique (DLS) 1
Indice de polydispersité Dispersion de la lumière dynamique (DLS) 1
Potentiel Zêta Dispersion de la lumière dynamique (DLS) 1
Essai de puissance cellulaire Transfection cellulaire Mise en culture des cellules, transfection cellulaire 4
Détection de la protéine cible Observation par fluorescence, Western Blot/ELISA 1-3
Étude de cas

Nous avons transfecté des échantillons circRNA codant pour la protéine fluorescente verte renforcée (eGFP circRNA), mCherry circRNA et luciferas circRNA dans des cellules 293T, et nous avons détecté la protéine cible par signal fluorescent, luminescent ou coloré, par Western blot (WB) et par dosage immunoenzymatique (ELISA).

Essais de puissance cellulaire des échantillons circRNA par Yaohai Bio-Pharma

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