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Synthèse de circRNA personnalisée

Synthèse de circRNA personnalisée

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ARN IVT

Synthèse de circRNA personnalisée

L’ARNm circulaire (circRNA) a été largement utilisé dans l’étude des fonctions des gènes ou des protéines. Entre-temps, il est populaire dans le développement de produits biologiques prophylactiques et thérapeutiques, similaires à l’ARNm.

Yaohai Bio-Pharma a mis au point un ensemble de technologies de synthèse de circARN pour fournir un ARN de haute qualité, telles que la conception et l'optimisation de séquences, la transcription in vitro (IVT), la circularisation/cyclisation, la purification et l'encapsulation de nanoparticules lipidiques (LNP). Tous les produits sont commercialisés selon des normes strictes de contrôle de qualité (CQ).

Applications CircRNA

Comparé à l’ARNm linéaire, l’ARN circulaire (circRNA) a une structure plus stable et constitue un point chaud majeur dans la recherche actuelle sur les médicaments à base d’acide nucléique. Il a un large éventail d'applications dans différents domaines, qu'il s'agisse d'ARNcirc codants ou non codants, notamment les vaccins prophylactiques contre les maladies infectieuses, les vaccins thérapeutiques en oncologie, les médicaments thérapeutiques en oncologie, la thérapie de remplacement des protéines, la médecine régénérative, la thérapie cellulaire et génique (CGT). , rôle d'éponge moléculaire et aptamère d'ARN.

Détails du service
Processus Service en option Détails du service Délai de livraison (jour)
Conception et optimisation de séquences circRNA Conception et optimisation de séquences de codage Optimisation des codons CDS 1
Conception et optimisation de séquences non codantes Séquence d'intron et d'exon, conception et optimisation de bras homologues et d'espaceurs 1-2
Préparation du plasmide circulaire Synthèse de gènes Synthèse génétique (tiers) 7-10
Amplification plasmidique Amplification plasmidique 2
Extraction de plasmide
Préparation du plasmide linéarisé Linéarisation et purification des plasmides Linéarisation des Plasmides 1
Purification de l’ADN par linéarisation
Transcription et cyclisation in vitro Transcription et cyclisation in vitro Réactions de transcription et de cyclisation in vitro 1-2
Digestion de la RNase R
Optimisation facultative Composition de réaction, optimisation du temps 2-5
Purification du circARN Méthode de purification conventionnelle Précipitation du chlorure de lithium 1
Purification des billes magnétiques 1
Purification du circARN hautement pur Chromatographie Liquide Préparative Haute Performance (HPLC) 1-2
Échange de tampon Ultrafiltration 1
Lyophilisation des ARNcirc Remplissage d'échantillon Composite 2-3
Lyophilisation Pré-congélation
Séchage primaire (Sublimation)
Séchage secondaire (désorption)
Encapsulation circARN-LNP Encapsulation LNP Prétraitement des matériaux et des liquides 2
Mélange de dispositifs microfluidiques
Échange de tampon Filtration à flux tangentiel 1
stérilisé Filtration
Contrôle qualité de l'ADN plasmidique Concentration/pureté Spectrophotométrie ultraviolette (UV) 1-2
Conformation plasmidique Électrophorèse sur gel d'agarose (AGE)
Électrophorèse capillaire (CE)-Facultatif
Identification du plasmide Identification des enzymes de restriction/ÂGE
Contrôle qualité des circRNA Concentration/pureté Spectrophotométrie ultraviolette (UV) -
Purity Électrophorèse sur gel d'agarose (AGE)/E-Gel 0.5
HPLC en option 1
Contrôle qualité du circRNA-LNP Efficacité de l'encapsulation Méthode RiboGreen 1
La taille des particules Diffusion dynamique de la lumière (DLS) 1
Indice de polydispersité Diffusion dynamique de la lumière (DLS) 1
Potentiel Zeta Diffusion dynamique de la lumière (DLS) 1
Test de puissance basé sur les cellules Transfection cellulaire Placage cellulaire, transfection cellulaire 4
Détection des protéines cibles Observation de fluorescence, Western Blot/ELISA 1-3
Étude de cas

Nous avons transfecté le circRNA de protéine fluorescente verte améliorée (eGFP circRNA), le circRNA mCherry, le circRNA de luciférase dans des cellules 293T et avons détecté la protéine cible par fluorescence, signal luminescent ou coloré, Western blot (WB), test immuno-enzymatique (ELISA).

Tests de puissance cellulaire d'échantillons d'ARNcirc par Yaohai Bio-Pharma

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