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Préparation de protéines sans étiquette

Préparation de protéines sans étiquette

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Préparation de protéines sans étiquette

Les étiquettes protéiques, en tant que partenaires de fusion utilisés dans les technologies d’ADN recombinant, permettent une purification par affinité efficace en une seule étape pour diverses protéines/peptides présentant des caractéristiques différentes. Malgré cet avantage important, les acides aminés exogènes peuvent altérer la structure des protéines et leurs fonctions biologiques. Par conséquent, les protéines ou peptides non marqués (sans tag) sont davantage préférés pour garantir la sécurité et l’efficacité, en particulier dans le domaine biopharmaceutique. Une protéine recombinante avec une étiquette de fusion a des possibilités limitées d'obtenir une autorisation auprès des agences médicales/d'administration des médicaments.

Basé sur la plateforme de R&D de produits biologiques microbiens, Yaohai Bio-Pharma propose des services personnalisés de préparation de protéines non étiquetées (Tag-free) dédiés à la réalisation d'objectifs uniques de recherche, de développement et de fabrication à usage clinique.

Mots clés : production de protéines sans étiquette, purification de protéines non marquées, préparation de protéines basées sur des étiquettes libres, expression et purification de protéines sans étiquette, protéine cible hautement sans étiquette 

Application : recherche en médecine humaine, développement de la médecine animale, développement de vaccins recombinants, production de produits biologiques recombinants à grandes molécules

Notre plateforme de R&D microbienne

Nous sommes expérimentés dans l’ingénierie des souches microbiennes, la fermentation et la purification des produits.

Bactéries Escherichia coli (E. coli)

Levure: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Options personnalisées
Modalité Protéine recombinante
Matières premières Séquences génétiques, plasmides recombinants ou souches modifiées
(produits) livrables Purifier : >80%, >85%, >90% Quantité : 0.2~10 g (à déterminer par le projet)
Système d'expression et formation

E. coli sécrétion périplasmique, expression corporelle soluble et d'inclusion ;

Expression intracellulaire ou sécrétion de levure

Méthodes d'analyse Test d'ultraviolet (UV), d'acide bicinchoninique (BCA), Bradford ou Lowry pour la quantité
Électrophorèse sur gel de polyacrylamide au dodécyl-sulfate de sodium (SDS-PAGE) pour les tests de purification
Facultatif : Western blot (WB), test immuno-enzymatique (ELISA), chromatographie liquide haute performance (HPLC)
Impuretés résiduelles Endotoxine (facultatif)
Détails du service

Services

Détails du service

Délai minimal (jour ouvrable)

Synthèse des gènes

Optimisation des codons pour un hôte d'expression spécifique

7 ~ jours 10

Synthèse des gènes

Construction plasmidique/vecteur

Clonage dans un plasmide/vecteur

2 jours

Transformation plasmidique

Vérification par réaction en chaîne par polymérase (PCR), digestion par enzymes de restriction, séquençage de gènes

3 jours

Expression des protéines dans E. coli

Transformation plasmidique,

2 jours

Culture en shake flask

3 jours

Fermentation en sac 7L, optimisation

4 jours/lot

Purification et optimisation des protéines sans étiquette

5 ~ 10 jours/lot

Test par électrophorèse sur gel de polyacrylamide et de dodécylsulfate de sodium (SDS-PAGE)

Expression des protéines dans la levure

Préparation de cellules compétentes de levure

4 jours

Linéarisation et électrotransformation des plasmides

Fermentation en sac 7L, optimisation

5 jours

Purification et optimisation des protéines sans étiquette

7 jours/lot

Purification des protéines sans étiquette

5 ~ 10 jours/lot

CQ par SDS-PAGE

Services supplémentaires (facultatif)
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