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Déamidation des acides aminés

Déamidation des acides aminés

La déamidation des chaînes latérales de la glutamine et de l'asparagine est une modification courante en termes d'impact sur les propriétés des biopharmaceutiques protéiques. La déamidation peut se produire dans les résidus de glutamine, mais généralement à un taux beaucoup plus faible. Les taux de déamidation sont influencés par la température, le pH, la structure locale de la protéine et les résidus d'acides aminés adjacents.

Yaohai BioPharma propose un service de test de déamidation des acides aminés, qui vous permet de détecter la déamidation des acides aminés par Chromatographie Liquide-Spectrométrie de Masse (LC-MS).

Nous avons été impliqués dans la Caractérisation Structurale des Protéines de diverses grandes molécules, y compris les Vaccins Recombinants à Sous-unités, les Nanocorps/VHHs/Anticorps à Domaine Unique (sdAbs), les Fragments d'Anticorps, les Hormones/Péptides, les Cytokines, les Facteurs de Croissance (CF), les Enzymes, les Collagènes, etc.

Exigences Réglementaires pour la Déamidation des Acides Aminés

Conformément aux lignes directrices ICH Q6B, les formes déamidées peuvent être détectées et caractérisées par des méthodes analytiques chromatographiques, électrophorétiques et/ou d'autres méthodes pertinentes.

Méthodes analytiques
Analyse Méthodes
Déamidation Chromatographie en phase liquide - Spectrométrie de masse (LC-MS)
Procédures

par ex., déamidation aspartique

1. Digestion enzymatique

2. LC-MS sous la condition de Chromatographie en Phase Liquide à Haute Performance (HPLC)

3. Analyse des données

La déamidation de l'asparagine se produit via un intermédiaire succinimide (Suc), qui est sensible à la racémisation et à l'hydrolyse, produisant quatre isomères d'acide aspartique, y compris L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp et D-IsoAsp.

En théorie, la déamidation du Gln pourrait générer quatre isomères correspondants de Glu par un processus similaire à celui de la déamidation de l'Asn.

La spectrométrie de masse à haute résolution identifie facilement la différence de masse de 1 Da entre les peptides contenant de l'Asn/Gln et leurs homologues déaminés correspondants Asp/Glu.

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