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Ingénierie des contraintes

Ingénierie des contraintes

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CDMO microbien

Ingénierie des contraintes

L’importance de l’ingénierie des contraintes

L'ingénierie des souches vise à rendre l'expression hôte présentant les caractéristiques attendues, ce qui est nécessaire au développement des CMC biologiques et détermine la qualité et la cohérence du produit et du processus de fabrication.

Mots clés : génie génétique et criblage de souches, construction de souches d'expression protéique, ingénierie de cellules microbiennes, ingénierie de souches bactériennes, ingénierie de souches de levure, construction de micro-organismes procaryotes, ingénierie de micro-organismes eucaryotes, souche modifiée

Application : médecine humaine, médecine animale, vaccin, biologie synthétique, produits biologiques recombinants à grosses molécules, réactif biologique

Services d'ingénierie de souches de Yaohai Bio-Pharma

Bénéficiant de plus de 10 ans d’expérience CDMO dans les produits biologiques microbiens, nous avons accumulé une riche expérience dans l’ingénierie et la sélection de divers types de vecteurs plasmidiques et d’hôtes microbiens (bactéries, levures). Nous pouvons trouver le meilleur système d’expression pour vos produits biologiques uniques.

Nous avons collecté divers hôtes microbiens avec des sources claires et un CoA standard, notamment

Bactéries Escherichia coli (E. coli)

Levure: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Détails du service

Services

Détails du service

Délai minimum/jour

(produits) livrables

Ingénierie des contraintes

knock-out de gène ou suppression de gène

À déterminer

Rapport d'ingénierie de déformation

Gene knock-in ou insertion de gène

Construction de souches (E. coli)

Transformation plasmidique (multi-hôtes)

5

COA des hébergeurs commerciaux,

Rapport de construction de souche

Vérification PCR

Purification des souches

Préservation des souches

Construction de souche (levure)

Préparation de cellules de levure compétentes

10

Linéarisation plasmidique

Transformation électro

Dépistage des résistances/carences nutritionnelles

Purification des souches

Préservation des souches

Sélection d’hôtes appropriés

Extraction d'ADN plasmidique ou génomique

15-20

Processus de sélection des hôtes,

Rapport de test des souches modifiées

Vérification PCR, digestion par enzymes de restriction

Séquençage du gène cible

Criblage d'hôtes à haute expression

Criblage d’hôtes présentant une stabilité génétique

Préservation des souches
Étude de cas

L'ingénierie Hansenula polymorpha a amélioré le rendement d'expression du HPV L1 VLP. 

Nous avons établi de la levure Hansenula polymorpha (H. polymorpha) plateforme d'ingénierie et de criblage pour l'expression de protéines/peptides recombinants. Dans un premier temps, nous avons généré H. polymorphe souches déficientes en protéase par suppression ciblée de gènes. Deuxièmement, un vecteur portant le gène HPV L1 a été transformé en virus compétent. H. polymorphe cellule. Enfin, nous sélectionnons le meilleur clone parmi des centaines d’options, avec une stabilité génétique et des propriétés de production élevées.

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Nos caractéristiques de service

Nous avons démontré une expertise sur divers hôtes microbiens, par exemple, Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21 ; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, souche PichiaPink1/2/3/4 ; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) et Hansenula polymorpha (H. polymorpha).

Nous sommes expérimentés avec E. coli la sécrétion périplasmique, l'expression des corps solubles et d'inclusion, ainsi que l'expression intracellulaire ou de sécrétion de levure.

Nous n’ajoutons aucun antibiotique ou ajoutons les antibiotiques conformément aux directives réglementaires.

Nous établissons une plateforme de criblage à haut débit pour cribler des souches stables et hautement productives parmi plus d’une centaine de souches candidates.

Nous veillons à ce que le processus d'ingénierie et de sélection des souches soit traçable, dans le cadre d'une bonne gestion des données et des enregistrements.

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