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Liens disulfure

Analyse des liens disulfure

Les ponts disulfure sont parfois appelés liaisons S-S ou ponts disulfure. Les ponts disulfure influencent l'activité biologique des biologiques, comme les peptides, les protéines et les anticorps.

Yaohai Bio-Pharma propose des services d'analyse des liens disulfure principalement basés sur la Chromatographie en Phase Liquide-Couplée à la Spectrométrie de Masse (LC-MS).

Nous avons été impliqués dans la caractérisation structurale des protéines de diverses grandes molécules, y compris les vaccins à sous-unités recombinants, les nanocorps/VHHs/anticorps à domaine unique (sdAbs), les fragments d'anticorps, les hormones/peptides, les cytokines, les facteurs de croissance (FC), les enzymes, les collagènes, etc.

Exigences réglementaires pour les liens disulfure

Il existe différents nombres et formations de ponts disulfure dans différents biologiques, qui doivent être pleinement évalués lors des études de caractérisation des protéines si la séquence primaire attendue d'acides aminés du produit contient l'acide aminé cystéine. Cela est également exigé par le document réglementaire ICH Topic Q6B.

Méthodes analytiques
Analyse Méthodes
Liens disulfure Chromatographie liquide-Spectrométrie de masse (LC-MS) après digestion

Pour les données nécessaires à l'évaluation complète des ponts disulfure et des thiols libres, les scientifiques de Yaohai Bio-pharma réalisent une cartographie des peptides après digestion avec une protéase spécifique. Ensuite, ils analysent en utilisant la LC/ Ionisation par pulvérisation électrospray Spectrométrie de masse (ES-MS) et/ou LC/ES-MS/MS avant et après réduction.

Yaohai Bio-pharma peut également effectuer le test d'Ellman, qui est une partie importante de toute évaluation complète d'un produit contenant du cystéine. Dans le cadre du test d'Ellman, nous dérivons les sulfhydryls en utilisant (5,5’-dithio-bis-[2-nitrobenzoïque]). Pour déterminer les niveaux de thiols libres, le produit résultant est analysé par spectrophotométrie UV à 412 nm.

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