Yaohai Bio-Pharma propose des services de test de séquence N-terminale et d'analyse de données basés sur la chromatographie liquide-spectrométrie de masse (LC-MS) ou la méthode de dégradation d'Edman, qui vous permet de déterminer les acides aminés aux extrémités respectives de la protéine d'intérêt. La modification N-terminale peut également être analysée par LC-MS.
Nous avons été impliqués dans la caractérisation structurale des protéines de diverses grosses molécules, notamment les vaccins sous-unitaires recombinants, les nanobodies/VHH/anticorps à domaine unique (sdAbs), les fragments d'anticorps, les hormones/peptides, les cytokines, les facteurs de croissance (GF), les enzymes, les collagènes, etc.
Exigences réglementaires pour le séquençage N-terminal
Selon les directives ICH Q6B, il est nécessaire de confirmer la séquence de votre protéine et d’examiner les terminaisons pour détecter toute variation pouvant exister.
Méthodes de séquençage des terminaux N
| Analyse |
Méthode |
| Séquençage N-terminal |
Dégradation d'Edman, Chromatographie Liquide-Spectrométrie de Masse (LC-MS) |
Procédures
LC-MS
1. Marquage fluorescent N-terminal des protéines
2. Digestions multiples
3. Analyse LC-MS/spectrométrie de masse (MS)
Dégradation d'Edman
1. Électrophorèse sur gel de dodécylsulfate de sodium (SDS) de votre protéine cible
2. Transférer le gel sur les membranes de fluorure de polyvinylidène (PVDF) et colorer.
3. Identifiez et coupez la bande de protéine cible
4. Séquençage d'Edman de l'extrémité N-terminale
5. L'analyse des données
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