Yaohai Bio-Pharma propose des services de test de séquençage terminal N et d'analyse de données basés sur la Chromatographie en Phase Liquide-Spectrométrie de Masse (LC-MS) ou la méthode de dégradation d'Edman, ce qui vous permet de déterminer les acides aminés aux terminaisons respectives de la protéine d'intérêt. Les modifications terminales N peuvent également être analysées par LC-MS.
Nous avons été impliqués dans la caractérisation structurale des protéines de diverses grandes molécules, y compris les vaccins à sous-unités recombinants, les nanocorps/VHHs/anticorps à domaine unique (sdAbs), les fragments d'anticorps, les hormones/peptides, les cytokines, les facteurs de croissance (FC), les enzymes, les collagènes, etc.
Exigences réglementaires pour le séquençage terminal N
Selon les lignes directrices ICH Q6B, il est nécessaire de confirmer la séquence de votre protéine et d'examiner les extrémités pour toute variation éventuelle.
Méthodes de séquençage terminal N
| Analyse |
Méthode |
| Séquençage en Terminus N |
Dégradation d'Edman, Chromatographie en Phase Liquide-Spectrométrie de Masse (LC-MS) |
Procédures
LC-MS
1. Marquage fluorescent du terminus N des protéines
2. Digestions multiples
3. Analyse par LC-MS/Mass Spectrométrie (MS)
Dégradation d'Edman
1. Électrophorèse en gel de Sulfate de Dodecyle de Sodium (SDS) de votre protéine cible
2. Transfert du gel vers des membranes en Fluorure de Polyvinylidène (PVDF) et coloration
3. Identifier et couper la bande de la protéine cible
4. Séquençage d'Edman du terminus N
5. Analyse des données
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