L'analyse du site de N-glycosylation est cruciale pour comprendre les fonctions des glycanes. Yaohai Bio-Pharma utilise la chromatographie liquide-spectrométrie de masse (LC-MS) après clivage enzymatique pour le site de N-glycosylation.
Nous avons été impliqués dans la caractérisation structurale des protéines de diverses grosses molécules, notamment les vaccins sous-unitaires recombinants, les nanobodies/VHH/anticorps à domaine unique (sdAbs), les fragments d'anticorps, les hormones/peptides, les cytokines, les facteurs de croissance (GF), les enzymes, les collagènes, etc.
Exigences réglementaires pour le site de N-glycosylation
Selon la directive ICH Q6B, « pour les glycoprotéines, la teneur en glucides (sucres neutres, sucres aminés et acides sialiques) est déterminée. De plus, la structure des chaînes glucidiques, le profil des oligosaccharides (profil d'antenne) et le(s) site(s) de glycosylation de la chaîne polypeptidique sont analysés dans la meilleure mesure possible.
Méthode analytique
| Analyse |
Méthodologie |
| Site de N-glycosylation |
Chromatographie Liquide-Spectrométrie de Masse (LC-MS) après clivage enzymatique |
Procédures
1. Digestion enzymatique de la protéine à l’aide de trypsine ou d’une autre protéase
2. Glycopeptides fragmentés séparés
3. Confirmez le site de N-glycosylation par LC-MS
4. Analyser les données
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