في التوليف المختبري للmRNA
المكونات الرئيسية لـ mRNA هي 5'-cap، 5'-UTR، إطار القراءة المفتوح (ORF)، 5'-UTR، و5' poly A tail، والتي تعتبر ضرورية للحفاظ على وظيفة mRNA. استخدم الباحثون مجموعة متنوعة من الأساليب لتحديد وتحسين تسلسلات وهياكل mRNA.
يتم إجراء تخليق mRNA على أساس النسخة المختبرية (IVT) باستخدام قوالب DNA الخطية، وبوليميرات RNA (T3، T7، أو SP6)، والنيوكليوتيدات غير المعدلة أو المعدلة، والإنزيمات، والكواشف المناسبة.
5' تعديل الغطاء
تُظهر تسلسلات الرنا المرسال الناضج من الخلايا حقيقية النواة غطاء 7-ميثيلجوانوسين (m7G) في النهاية 5'، مما يحسن استقرار الرنا المرسال وكفاءة الترجمة. هناك طريقتان عامتان لالتقاط mRNA في المختبر. أولاً، يمكن تغطية mRNA مع النسخة المختبرية عن طريق إضافة غطاء تناظري لبنية m7GpppG (على سبيل المثال، CleanCap) إلى نظام IVT. توفر طريقة السد النسخي المشترك هذه بنية كبسولة طبيعية بحجم 5 بوصات وتزيد من كفاءة السد إلى ما يقرب من 90-99%. ثانيًا، يمكن أيضًا تحقيق رسم خرائط mRNA عن طريق رسم خرائط تفاعلات الإنزيمات بعد تفاعل النسخ في المختبر.
تعديل بوليا
يعمل ذيل Poly(A) أيضًا على تمديد نصف عمر mRNA في الجسم الحي ويحسن كفاءة ترجمة mRNA. يجب أن يكون طول الذيل المتعدد (A) المضخم 100-300 نيوكليوتيدات. بالإضافة إلى ذلك، يزيد الأدينوزين المعدل من ثبات ذيل بولي A ضد تدهور RNase الخلوي. يمكن إدراج ذيل بولي عن طريق النسخ في المختبر باستخدام قالب الحمض النووي الذي يشفر بولي A، مما يؤدي إلى طول تسلسل بولي محدد. يمكن أيضًا استخدام بوليميريز البوليميراز المؤتلف بواسطة عديد الأدينيلات الأنزيمية بعد نسخ الرنا المرسال.
تعديل النيوكليوتيدات
يمكن أن تمنع النيوكليوسيدات المعدلة التعرف على مستقبلات التعرف على الأنماط (PRR) و/أو تنشيطها وتعزز فعالية لقاحات mRNA بطريقتين مختلفتين تمامًا. يمكن أن تؤدي إضافة بعض النيوكليوسيدات المعدلة كيميائيًا بما في ذلك السودوريدين (ψ)، و1-ميثيل بسودوريدين (m1ψ)، والثيوريدين (s4U)، و5-ميثيل سيتوزين (m5C) إلى منع تنشيط TLR7/8 والمستقبلات المناعية الفطرية الأخرى، مما يقلل بشكل كبير من المناعة. من مرنا.
نظام تسليم مرنا
للحفاظ على وظيفة mRNA، فإنه يحتاج إلى دخول السيتوبلازم المضيف والتعبير عن مستضدات محددة. أحد أصعب التحديات التي تواجه لقاحات وعلاجات الرنا المرسال يكمن في توصيل الرنا المرسال إلى الخلايا المستهدفة بمستويات ترجمة عالية بما فيه الكفاية لأنه يتطلب أنظمة توصيل الرنا المرسال محددة وفعالة للغاية. تم تطوير واستخدام العديد من نواقل توصيل الرنا المرسال، بما في ذلك الخلايا الجذعية (DC)، والبروتامين، والبوليمرات الكاتيونية، والجسيمات الشحمية الكاتيونية.
مجمعات الدهون الموجبة مع مرنا وغيرها من الاستعدادات يمكن أن تشكل بشكل جماعي 80-200 نانومتر الحجم الجسيمات النانوية المسماة الجسيمات النانوية الدهنية (LNPs). باعتبارها واحدة من أنظمة توصيل mRNA الأكثر تقدمًا، يتضمن LNP الدهون الموجبة المؤينة، والدهون الفوسفاتية الطبيعية، والكولسترول، والبولي إيثيلين جلايكول (PEG). تعتمد العديد من لقاحات وعلاجات الحمض النووي الريبوزي (siRNA وmRNA) المعتمدة من قبل إدارة الغذاء والدواء الأمريكية على أنظمة توصيل LNP.
تقدم شركة Yaohai Bio-Pharma حلاً شاملاً للحمض النووي الريبوزي (RNA).
التسليمات المخصصة
|
الصف
|
التسليمات
|
المواصفات الخاصه
|
التطبيقات
|
|
غير GMP
|
المادة الدوائية، mRNA
|
0.1 ~ 10 ملغ (مرنا)
|
البحوث قبل السريرية مثل ترنسفكأيشن الخلايا، وتطوير الطريقة التحليلية، ودراسات ما قبل الاستقرار، وتطوير التركيبة
|
|
المنتج الدوائي، LNP-mRNA
|
|
GMP، العقم
|
المادة الدوائية، mRNA
|
10 ملغ ~ 70 جم
|
الدواء التجريبي الجديد (IND)، ترخيص التجارب السريرية (CTA)، إمدادات التجارب السريرية، طلب الترخيص البيولوجي (BLA)، العرض التجاري
|
|
المنتج الدوائي، LNP-mRNA
|
5000 قارورة أو محاقن / خراطيش مملوءة مسبقًا
|
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
لا
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
