Biološke zdravilne učinkovine so kompleksne velike molekule, še posebej občutljive na okoljske dejavnike: temperaturo, oksidacijo, svetlobo, vsebnost ionov in strig. Ključnega pomena je izvesti študije stabilnosti zdravilne učinkovine in zdravila v predvidenih pogojih shranjevanja, pospešenih pogojih in pogojih prisilne razgradnje. Podatki o stabilnosti se običajno uporabljajo za podporo roka uporabnosti, roka uporabnosti in pogojev shranjevanja.
Po smernicah ICH Q5C Yaohai Bio-Pharma ponuja storitve študij stabilnosti za proteine, peptide, plazmide in mRNA, ki vključujejo študije dolgoročne stabilnosti, pospešene študije stabilnosti in študije prisilne razgradnje. Poleg tega imamo vse potrebne zmogljivosti za shranjevanje vzorcev in analizo kritičnih lastnosti kakovosti (CQA) za zbiranje podatkov o stabilnosti.
Regulativne zahteve za študije stabilnosti
V skladu s smernico ICH Q5C je treba razviti ustrezne podporne podatke o stabilnosti biotehnoloških/bioloških izdelkov, saj lahko številni zunanji pogoji vplivajo na moč, čistost in kakovost izdelka. Prav tako se močno priporoča, da se študije zdravilne učinkovine in zdravila izvajajo v pospešenih in stresnih pogojih.
Študije stabilnosti v realnem času (dolgoročne).
Pri sprotnem (dolgoročnem) testiranju stabilnosti se zdravilna učinkovina ali zdravilni izdelek hrani pod predvidenimi pogoji shranjevanja in se spremlja, dokler se biološke lastnosti ne spremenijo čez sprejemljive meje. Kot rezultat študij dolgoročne stabilnosti je mogoče določiti rok uporabnosti, rok uporabe, pogoje shranjevanja in intervale vzorčenja/testiranja.
Tabela 1. Pogostost testiranja v študijah dolgoročne stabilnosti bioloških zdravil pred odobritvijo
| Rok uporabnosti |
Intervali testiranja |
Časovne točke |
| 1 leto ali manj |
Mesečno prve 3 mesece;
Vsake 3 mesece po tem
|
Pri 0, 1, 2, 3, 6, 9 in 12 mesecih |
| Več kot 1 leto |
Vsake 3 mesece v prvem letu;
Vsakih 6 mesecev drugo leto;
Nato vsako leto
|
Pri 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 mesecih in nato vsako leto |
Pospešene študije stabilnosti
Priporočena temperatura shranjevanja biofarmacevtikov za injiciranje je običajno med 2 in 8 ℃. Pospešene študije stabilnosti se izvajajo s krajšim trajanjem v pospešenih pogojih, kot je visoka temperatura. Podatki o stabilnosti so priznani kot podporne informacije za stabilnost izdelka in se pogosto uporabljajo pri določanju roka uporabnosti in roka uporabnosti ter pri razvoju formulacij.
Tabela 2. Primeri pospešenih študij stabilnosti
| Študije stabilnosti |
Pospešeni pogoji |
Mesta vzorčenja |
| Pospešene študije stabilnosti |
povišana temperatura
relativna vlažnost
|
Pri 0, 1, 2, 3, 6 mesecih |
Študije prisilne degradacije
Cilj študij prisilne razgradnje je zbrati podatke o stabilnosti v pogojih stresa, kot so visoke temperature, vlaga, svetloba, oksidacija, zamrzovanje-odmrzovanje ali mehanske obremenitve (tresenje, striženje). Študije prisilne razgradnje zdravilne učinkovine ali zdravila v ekstremnih pogojih lahko pomagajo prepoznati ključne dejavnike/parametre, ki vodijo do razgradnje bioloških zdravil. Ti podatki so uporabni za oceno robustnosti formulacije in proizvodnega procesa.
Tabela 3. Primeri študij prisilne degradacije
| Stres |
Stresna stanja |
Čas trajanje |
| temperature |
Visoka temperatura (npr. 25 ℃, 30 ℃, 37 ℃, 40 ℃) |
Dnevi-meseci |
| Vlažnost |
Relativna vlažnost (0~100%) |
Dnevi-meseci |
| Svetloba |
Najmanj 1.2 milijona lx h in 200 W h/m2 |
Nekaj dni |
| Zamrzovanje-odmrzovanje |
zamrzovanje–tajanje (od -20 ℃, -80 ℃ do 15 ℃) |
1~5 ciklov |
| Stresanje, mešanje |
50 ~ 500 vrt / min |
Ure-dnevi |
Analitske metode, ki podpirajo študije stabilnosti
| Kritični atributi kakovosti (CQA) |
Analitske metode |
| Skupna vsebnost beljakovin |
UV, BCA, Bradford, Lowry |
| Vidni delci |
Vizualni pregled |
| Združevanje, fragmenti |
Dinamično sipanje svetlobe Izključitvena kromatografija (SEC), HPLC/UPLC, kapilarna elektroforeza CE (CGE, CZE, ciEF/iCIEF), nereducirajoča SDS-PAGE |
| Kartiranje in sekvenciranje peptidov |
LC-MS/MS |
| Disulfidne vezi |
LC-MS/MS |
| PTM (oksidacija, izomerizacija, deamidacija, glikozilacija) |
LC-MS/MS |
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
