Analiza N-glikozilacijskih strani je ključna za razumevanje funkcij glikanov. Yaohai Bio-Pharma uporablja tekočnostno kromatografijo-masno spektroskopijo (LC-MS) po enzimski odsekanju za N-glikozilacijske strani.
Bili smo vpleteni v karakterizacijo strukture proteina različnih velikih molekul, vključno s rekombinantnimi podjediničnimi cepivami, nanotijelami/VHHs/ enodomenskimi tijelom (sdAbs), odlomki tijel, hormoni/peptidi, citokinskega, rastnih faktorjev (GF), enzimov, kolagenov itd.
Uredbeni zahtevki za N-glikozilacijsko stran
Po smernici ICH Q6B, „za glikoproteine se določi sadžaj ogljikovodov (neutralni šećeri, aminoglukozi in sajninske kisline). Poleg tega so strukture verižcev ogljikovodov, vzorec oligoglukozev (antenski profil) in glikozilacijske strani polipeptidskega verižca analizirane v največji možni obsegu.“
Analitična metoda
| Analiza |
Metode |
| N-glikozilacijsko mesto |
Jedrska kromatografija-masna spektrometrija (LC-MS) po enzimski cleavage |
Postopki
1. Enzimska degeneracija proteina z trypsino ali drugo proteazo
2. Loči fragmente glikopeptidov
3. Potrdi N-glikozacijonsko mesto s LC-MS
4. Analiziraj podatke
SL
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
