Minicircle DNA (mcDNA) е помал ДНК вектор без вируски карактеристики, кој се изведува од структурата на парентелското плазмидно ДНК. Минициркуларното ДНК се разликува од конвенционалното плазмидно ДНК во тоа што ги содржи промотор и ген на интерес (GOI), но без репликативен origins (ORI) и секвенци за селекција (selMark). Минициркуларното ДНК се производи во бактерии преку ре kombinacija in vivo за да се отстранат дополнителните низи (наричани мини-плазмид) од плазмидното ДНК. Бидејќи е безбедно, минициркуларното ДНК стана популарно како не-вируски вектор за генска терапија, ДНК ваксини итн.
Слика 1. Структура на Плазмидно ДНК (pDNA) и Минициркуларно ДНК (mcDNA)
Рекомбинациони системи на Минициркуларно ДНК
Постојат четири главни системи за рекомбинација на минициркуларно ДНК in vivo кои се проучуваат, вклучувајќи Фаж λ интеграза, Фаж P1 Cre рекомбиназа, ParA резолваза, PhiC31 интеграза/I-SceI.
|
Стратегија
|
Фаж λ интеграза
|
Фаж P1 Cre рекомбиназа
|
ParA резолваза
|
PhiC31 интеграза/I-SceI
|
|
Механизам
|
Тирозин рекомбиназа, која функционира преку протеините FIS и IHF за да катализира рекомбинацијата на att хибридни сайтови
|
Сајт-специфична тирозин рекомбиназа, која извршува двонасочна рекомбинација при врзка со локсP сайтови
|
Серин рекомбиназа, која извршува необратлива и еднонасочна рекомбинација помеѓу два идентични MRS сайтови
|
Серин рекомбиназа, која медирира еднонасочна рекомбинација помеѓу attP/attB вршкови, додека I-SceI еndonuclease ја секира производот-поврзаните импуритети и нерекомбинираните родителски плазмиди
|
|
Карактеристики
|
Зависат од изразот на хост факторите FIS и IHF; интринзиска токсинност; Остатоци од родителскиот плазмид и мини-плазмид
|
Остатоци од родителскиот плазмид и мини-плазмид
|
Висока добивка; Остатоци од родителскиот плазмид и мини-плазмид
|
Деградација на родителскиот плазмид поврзана со намалена добивка
|
Yaohai Bio-Pharma Нуди Интегрално Решение CDMO за Минициркулар ДНК
Референца:
[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. Minicircle DNA: The Future for DNA-Based Vectors? Trends Biotechnol. 2020 Oct;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
