Žymės pašalinimo proteazės
Norėdami pagerinti rekombinantinių baltymų tirpumą ir supaprastinti gryninimo procesą, mokslininkai paprastai prideda suliejimo žymes, iš kurių dažniausiai naudojami His-žymas, maltozę surišantis baltymas (MBP) ir glutationo-S-transferazė (GST).
Nors pažymėta kaip papildoma baltymų seka, ji turėtų būti pašalinta, kad būtų išlaikytas biologinis aktyvumas farmacijos pramonėje. Norint pašalinti suliejimo žymes, reikalingos vietai specifinės proteazės, tokios kaip enterokinazė (EK), trombinas, tabako ėsdinimo viruso proteazė (TEVp), žmogaus rinoviruso proteazė 3C (HRV3C), mažo ubikvitiną modifikuojančio baltymo (SUMO) proteazė, tabako venų marumo virusas ( TVMV) proteazė ir karboksipeptidazė A/B (CPA/CPB).
Tipas
|
Fermentas
|
Atpažinimo svetainė
|
Žymės pašalinimas endoproteazės
|
Enterokinazė (EK), Enteropeptidazė
|
DDDDK↓
|
Trombinas
|
LVPR↓GS
|
TEV proteazė
|
ENLYFQ↓G
|
HRV3C proteazė
|
LEVLFQ↓GP
|
SUMO proteazė
|
SUMO tretinė struktūra
|
TVMV proteazė
|
ETVRFQG↓S
|
Žymės pašalinimas egzoproteazės
|
Karboksipeptidazė A (CPA)
|
C-galinės aminorūgštys, išskyrus Pro, Lys ir Arg
|
Karboksipeptidazė B (CPB)
|
C-galas Lys ir Arg
|
Kitos proteazės
taikymas
|
Fermentas
|
Funkcija
|
Kitos proteazės
|
Proteazė K
|
Serino proteazė, kuri skaido baltymus hidrolizuodama peptidinius ryšius.
|
IdeS, IgG proteazė
|
IgG skaidantys fermentai (Ides), kurie skaidosi tam tikroje imunoglobulino G (IgG) vietoje ir sukuria Fab ir Fc fragmentus
|
IgA1 proteazė
|
Proteolitinis fermentas, skaidantis specifinę vietą žmogaus imunoglobulino A1 (IgA1) vyrių srities sekoje.
|
Nukleazė
taikymas
|
Fermentas
|
Funkcija
|
Nukleazė
|
Nukleazė
|
Skaldo nukleino rūgštis (DNR arba RNR) hidrolizuodamas fosfodiesterio ryšius.
|
Apriboti fermentą
|
Endonukleazė, skaidanti DNR tam tikrose vietose arba šalia jų.
|
Amidazė
taikymas
|
Fermentas
|
Funkcija
|
Amidazė
|
PNGazė F
|
Atsiskiria tarp vidinės GlcNAc ir asparagino likučių, turinčių daug manozės, hibridinių ir sudėtingų oligosacharidų.
|
„Yaohai Bio-Pharma“ siūlo vieno langelio CDMO tirpalą fermentiniam reagentui