Peamised ensüümid pika RNA tootmiseks
mRNA kui pikka kodeeriva RNA tüüp toimis COVID-19 ajal ohutult ja tõhusalt laiemal hulgal inimestel. Teised pikalt kodeerivad RNA-d, nagu isevõimenev RNA (saRNA) ja tsirkulaarne mRNA (circRNA), näitasid samuti prekliinilistes ja kliinilistes uuringutes tõhusust.
Pika kodeeriva RNA laiaulatuslik tootmine põhineb in vitro transkriptsioonil (IVT) mitmete ensümaatiliste reaktsioonide kaudu. RNA tootmise etapid hõlmavad matriitsi DNA valmistamist, IVT RNA sünteesi, tsirkulatsiooni, DNA eemaldamist, RNA modifitseerimist (korkimine ja sabastamine) ja RNA puhastamist.
Pikalt kodeeriva RNA (nt mRNA, saRNA ja tsircRNA) tootmisel kasutatakse mitmeid võtmeensüüme, sealhulgas restriktsiooni endonukleaasid, T7 RNA polümeraas (T7 RNAP), RNaasi inhibiitor, anorgaaniline pürofosfataas, DNaas I, vaktsiinia piirav ensüüm ja RNaas R.
|
Protsess
|
Ensüüm
|
funktsioon
|
|
Malli DNA ettevalmistamine
|
Restriktsiooni endonukleaasid
|
Plasmiidse DNA (pDNA) lineariseerimine, et vältida pikema transkripti genereerimist.
|
|
IVT RNA süntees
|
T7 RNA polümeraas (T7 RNAP)
|
Seostuda T7 promootoriga ja genereerida spetsiifiline RNA transkript; Mängige IVT reaktsiooni ajal võtmerolli.
|
|
RNaasi inhibiitor, rekombinantne
|
Inhibeerib RNaasi aktiivsust IVT reaktsiooni ajal.
|
|
Pürofosfataas, anorgaaniline (iPPase)
|
Vältige pürofosfaadi tekkimist IVT reaktsiooni ajal.
|
|
DNA eemaldamine
|
DNAaas I
|
Eemaldage DNA matriit.
|
|
RNA modifikatsioon
|
Vaktsiinia piirav ensüüm
|
Lisage IVT mRNA 1'-otstele Cap5 struktuurid.
|
|
2'-O-metüültransferaadid
|
|
tsirkRNA rikastamine
|
RNaas R
|
Seedige lineaarne RNA ja rikastage ringikujulist RNA-d.
|
Yaohai Bio-Pharma pakub ensüümide jaoks ühtset CDMO-lahendust
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
