Пратэазы для выдалення тэгаў
Каб палепшыць растваральнасць і спрасціць працэс ачысткі рэкамбінантных бялкоў, даследчыкі звычайна дадаюць тэгі зліцця, сярод якіх звычайна выкарыстоўваюцца His-tag, бялок, які звязвае мальтозу (MBP) і глутатыён-S-трансфераза (GST).
Пазначаны як дадатковая паслядоўнасць бялку, ён павінен быць выдалены для падтрымання біялагічнай актыўнасці ў фармацэўтычнай прамысловасці. Для выдалення злітых тэгаў патрэбны сайт-спецыфічныя пратэазы, такія як энтэракіназа (EK), трамбін, пратэаза віруса траўлення тытуню (TEVp), пратэаза 3C рынавіруса чалавека (HRV3C), пратэаза малога ўбіквіцін-мадыфікуючага бялку (SUMO), вірус плямістасці тытунёвых жылак ( TVMV) пратэазы і карбоксипептидазы A/B (CPA/CPB).
тып
|
Фермент
|
Сайт прызнання
|
Эндапратэазы выдалення тэгаў
|
Энтерокиназа (ЭК), Энтеропептидаза
|
DDDDK↓
|
Трамбін
|
LVPR↓GS
|
Протеаза TEV
|
ENLYFQ↓G
|
Пратэаза HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
Протеаза SUMO
|
СУМО троесная структура
|
Пратэаза TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
Экзопротеазы выдалення тэгаў
|
Карбаксіпептыдаза А (CPA)
|
C-канцавыя амінакіслоты, акрамя Pro, Lys і Arg
|
Карбаксіпептыдаза B (CPB)
|
С-канцавы Lys і Arg
|
Іншыя протеазы
дадатак
|
Фермент
|
функцыя
|
Іншыя протеазы
|
Пратэаза К
|
Серінавая пратэаза, якая расшчапляе вавёркі шляхам гідралізу пептыдных сувязяў.
|
IdeS, IgG протеаза
|
Ферменты, якія расшчапляюць IgG (Ides), якія расшчапляюць у пэўным месцы імунаглабулін G (IgG), ствараючы фрагменты Fab і Fc
|
Протеаза IgA1
|
Пратэялітычны фермент, які расшчапляе пэўны сайт у паслядоўнасці шарнірнай вобласці імунаглабуліну A1 (IgA1).
|
Нуклеаза
дадатак
|
Фермент
|
функцыя
|
Нуклеаза
|
Нуклеаза
|
Расшчапляе нуклеінавыя кіслоты (ДНК або РНК) шляхам гідралізу фосфадыэфірных сувязяў.
|
Абмежаваць фермент
|
Эндануклеаза, якая расшчапляе ДНК у пэўных месцах або побач з імі.
|
Амідаза
дадатак
|
Фермент
|
функцыя
|
Амідаза
|
PNGase Ф
|
Расшчапляе паміж самымі ўнутранымі GlcNAc і рэшткамі аспарагіну з высокім утрыманнем маннозы, гібрыдных і складаных алігацукрыдаў.
|
Yaohai Bio-Pharma прапануе ўніверсальнае рашэнне CDMO для ферментатыўнага рэагента