Minicircle DNA (mcDNA) — гэта меншы нявірусны вектар ДНК, які атрымліваецца з структуры батька-плазміднай ДНК. Minicircle DNA адмінае ад плазміднай ДНК тым, што ў яе ёсць прамутар і гена ўласнага цікавення (GOI), без пункта рэпляцыі (ORI) і маркера выбару (selMark). Minicircle DNA вырабляецца ў бактырыях праз рэкомбінацыю ў жывых, каб выдаліць дадатковыя паследовательнасці (званыя міні-плазміды) з плазміднай ДНК. У звязку з яго безпекай, minicircle DNA набыла популярнасці як нявірусны вектар для генаўнай тэрапіі, ДНК-ваксын і іншага.

Рысунак 1. Структура плазміднай ДНК (pDNA) і Minicircle DNA (mcDNA)
Сістэмы рэкомбінацыі Minicircle DNA
Існуе чатыры галоўных сістэмы рэкомбінацыі minicircle DNA ў жывых, якія былі даследаваныя, уключаючы фаж λ інтэгрэз, фаж P1 Cre рекамбіназа, ParA рэзаваза, PhiC31 інтэгрэз/I-SceI.
Стратэгія
|
Фаж λ інтэгрэз
|
Фаж P1 Cre рекамбіназа
|
ParA рэзаваза
|
PhiC31 інтэгрэз/I-SceI
|
Механізм
|
Тирозынавая рекамбіназа, якая працюе праз белкі FIS і IHF для каталяза рэкомбінацыі att гібрыдных сітуаў
|
Сайт-спэцыфічная тирозынавая рекамбіназа, якая выконвает дванаправленую рэкомбінацыю пры дасягненні локуса loxP
|
Серынавая рекамбіназа, якая выконвае непаваротную адзеннаправленую рэкомбінацыю паміж двума ідэнтычнымі MRSсайтамі
|
Серынавая рекамбіназа, якая медыйруе адзеннаправленую рэкомбінацыю паміж сай潭 attP/attB, у той час як эндонакулеаза I-SceI разрэзае produkта-адносныя цудныя ўклады і нарэкамбінованыя батькаўскія плазміды
|
Аб асоблівасцях
|
Залежыць ад экспрезіі хост-фактараў FIS і IHF; уладнае токсічнасць; залишкі батькаўскай плазміды і міні-плазміды
|
Залишкі батькаўскай плазміды і міні-плазміды
|
Высоная выдача; залишкі батькаўскай плазміды і міні-плазміды
|
Дэгрэдацыя батькаўскай плазміды, звязаная з зменшэннем выдачы
|
Yaohai Bio-Pharma Прапануе Адзінственнае Рашэнне CDMO для Мінікружковага DNA
Спадарожыце:
[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. Minicircle DNA: Будучыня для DNA-базаваных вектараў? Trends Biotechnol. 2020 Oct;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.