Minicircle DNA (mcDNA) is 'n kleiner, nie-viraal DNA-vryer wat afgelei word van 'n ouerplasmid DNA-struktuur. Minicircle DNA verskil van konvensionele plasmid DNA in dat dit die promotor en gen van belang (GOI) bevat, sonder 'n oorsprong van replikasie (ORI) en seleksiemerkers (selMark). Minicircle DNA word deur bakterië in vivo rekombinasie geproduseer om ekstra reekse (genoem mini-plasmid) van plasmid DNA te verwyder. Weens sy veiligheid, het minicircle DNA populariteit verkry as 'n nie-viraal vryer vir geneterapie, DNA-vakseenne, ens.

Figuur 1. Struktuur van Plasmid DNA (pDNA) en Minicircle DNA (mcDNA)
Minicircle DNA Rekombinasiestelsels
Daar is vier hoof minicircle DNA in vivo rekombinasiestelsels wat bestudeer is, insluitend Phage λ integrase, Phage P1 Cre rekombinase, ParA resolvase, PhiC31 integra se/I-SceI.
Strategie
|
Phage λ integrase
|
Phage P1 Cre rekombinase
|
ParA resolvase
|
PhiC31 integra se/I-SceI
|
Meganisme
|
Tyrosien rekombinase, wat deur die proteïene FIS en IHF funksioneer om die rekombinasie van att hibridusplekke te kataliseer
|
Plekspesifieke tyrosien rekombinase, wat 'n tweerigtingse rekombinasie uitvoer wanneer dit binde aan loxP plekke
|
Serien rekombinase, wat 'n onherstelbare en eenrigtingse rekombinasie tussen twee identiese MRS-plekke uitvoer
|
Serien rekombinase, wat eenrigtingse rekombinasie tussen attP/attB-bindingsplekke medieer, terwyl I-SceI endonuclease die produk-verwante impureiteite en ongerekonstrueerde ouerplasmiede skei
|
Funksies
|
Hang af van die uitdrukking van gashefaktore FIS en IHF; intrinsieke toksisiteit; Residuoue ouerplasmiede en mini-plasmiede
|
Residuoue ouerplasmiede en mini-plasmiede
|
Hoë opbrengs; Residuoue ouerplasmiede en mini-plasmiede
|
Degradasie van ouerplasmiede verbonde met verminderde opbrengs
|
Yaohai Bio-Pharma Bied Eenmalige CDMO Oplossing Vir Minikring DNA
Verwysing:
[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. Minikringel-DNA: Die Toekoms vir DNA-gebaseerde Vektore? Trends Biotechnol. 2020 Oct;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.