Tag borttagningsproteaser
För att förbättra lösligheten och förenkla reningsprocessen av rekombinanta proteiner lägger forskare vanligtvis till fusionstaggar, varav His-tag, maltosbindande protein (MBP) och glutation-S-transferas (GST) vanligtvis används.
Även om det är märkt som en extra sekvens av protein, bör det tas bort för att bibehålla biologisk aktivitet i läkemedelsindustrin. Avlägsnandet av fusionstaggar kräver platsspecifika proteaser, såsom enterokinas (EK), trombin, tobak etch virus proteas (TEVp), humant rhinovirus proteas 3C (HRV3C), litet ubiquitin modifierande protein (SUMO) proteas, tobaksvenfläckarvirus ( TVMV) proteas och karboxipeptidas A/B (CPA/CPB).
Typ
|
Enzym
|
Site för erkännande
|
Tag bort endoproteaser
|
Enterokinas (EK), Enteropeptidas
|
DDDDK↓
|
trombin
|
LVPR↓GS
|
TEV-proteas
|
ENLYFQ↓G
|
HRV3C-proteas
|
LEVLFQ↓GP
|
SUMO-proteas
|
SUMO tertiär struktur
|
TVMV-proteas
|
ETVRFQG↓S
|
Tag bort exoproteaser
|
Karboxipeptidas A (CPA)
|
C-terminala aminosyror, förutom Pro, Lys och Arg
|
Karboxypeptidas B (CPB)
|
C-terminal Lys och Arg
|
Andra proteaser
Ansökan
|
Enzym
|
Funktion
|
Andra proteaser
|
Proteas K
|
Ett serinproteas som smälter proteiner genom att hydrolysera peptidbindningar.
|
IdeS, IgG-proteas
|
IgG-nedbrytande enzymer (Ides) som klyver vid ett specifikt ställe av immunglobulin G (IgG), vilket genererar Fab- och Fc-fragment
|
IgA1-proteas
|
Ett proteolytiskt enzym som klyver specifik plats i den humana immunglobulin A1 (IgA1) gångjärnsregionsekvensen.
|
Nukleas
Ansökan
|
Enzym
|
Funktion
|
Nukleas
|
Nukleas
|
Klyver nukleinsyror (DNA eller RNA) genom att hydrolysera fosfodiesterbindningarna.
|
Begränsa enzymet
|
Ett endonukleas som klyver DNA på eller nära specifika platser.
|
Amidas
Ansökan
|
Enzym
|
Funktion
|
Amidas
|
PNGase F
|
Klyver mellan de innersta GlcNAc- och asparaginresterna av höga mannos-, hybrid- och komplexa oligosackarider.
|
Yaohai Bio-Pharma erbjuder One-Stop CDMO-lösning för enzymreagens