Všetky kategórie
ENEN
Služby prípravy proteínov bez značiek

Služby prípravy proteínov bez značiek

Domov >  Služby prípravy proteínov bez značiek

Využitie

Služby prípravy proteínov bez značiek

Proteínové značky, ako fúzni partneri používané v technológiách rekombinantnej DNA, umožňujú účinnú jednokrokovú afinitnú purifikáciu pre rôzne proteíny/peptidy s rôznymi charakteristikami. Napriek tejto dôležitej výhode môžu značky ako exogénne aminokyseliny meniť proteínovú štruktúru a biologické funkcie. Preto sú na zaistenie bezpečnosti a účinnosti, najmä v biofarmaceutickej oblasti, výhodnejšie proteíny alebo peptidy bez značiek. Rekombinantný proteín s fúznym tagom má obmedzené možnosti získania povolenia od lekárskych/liečivových agentúr.

Spoločnosť Yaohai Bio-Pharma, založená na platforme výskumu a vývoja v oblasti mikrobiálnej biológie, ponúka prispôsobené služby prípravy proteínov bez značiek (bez značiek) určené na splnenie jedinečných cieľov výskumu, vývoja a výroby na klinické použitie.

Kľúčové slová: produkcia proteínu bez tagov, purifikácia proteínov bez tagov, príprava proteínov na báze voľných tagov, expresia a purifikácia proteínov bez tagov, cieľový proteín vysoko bez tagov Aplikácia: výskum v humánnej medicíne, vývoj liekov na zvieratách, vývoj rekombinantných vakcín, rekombinantná veľká molekula produkciu biológie


Naša platforma mikrobiálneho výskumu a vývoja

Máme skúsenosti s inžinierstvom mikrobiálnych kmeňov, fermentáciou a čistením produktov.

Baktérie: Escherichia coli (E. coli)

Kvasinky: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Prispôsobené možnosti

Metóda Rekombinantný proteín
Východiskové materiály Génové sekvencie, rekombinantný plazmid alebo skonštruované kmene
dodávky Čistenie: ＞80%, ＞85%, ＞90% Množstvo: 0.2~10 g (určí sa podľa projektu)
Výrazový systém a tvorba periplazmatická sekrécia E. coli, expresia rozpustných a inklúznych teliesok; Kvasinková intracelulárna alebo sekréčná expresia
Analytické metódy Ultrafialové (UV), test na kyselinu bicinchonínovú (BCA), Bradford alebo Lowry pre množstvo Elektroforéza na polyakrylamidovom géle s dodecylsulfátom sodným (SDS-PAGE) na testovanie purifikácie Voliteľné: Western blot (WB), enzýmová imunoanalýza (ELISA), vysoký výkon kvapalinová chromatografia (HPLC)
Zvyškové nečistoty Endotoxín (voliteľné)

Podrobnosti o službách

Služby Detaily služby Minimálna časová os (pracovný deň)
Syntéza génov Optimalizácia kodónov pre špecifického expresného hostiteľa 7 ~ 10 dni
Syntéza génov
Plazmidová/vektorová konštrukcia Klonovanie do plazmidu/vektora 2 dní
Transformácia plazmidu
Overenie polymerázovej reťazovej reakcie (PCR), štiepenie reštrikčnými enzýmami, sekvenovanie génov 3 dní
Expresia proteínov v E. coli Transformácia plazmidu, 2 dní
Kultivácia v trepačke 3 dní
7L-sacle fermentácia, optimalizácia 4 dni / dávka
Čistenie proteínov bez značiek, optimalizácia 5 ~ 10 dní / dávka
Testovanie elektroforézou na polyakrylamidovom géli s dodecylsulfátom sodným (SDS-PAGE)
Expresia bielkovín v kvasinkách Príprava kvasinkových kompetentných buniek 4 dní
Linearizácia a elektrotransformácia plazmidu
7L-sacle fermentácia, optimalizácia 5 dní
Čistenie proteínov bez značiek, optimalizácia 7 dní / dávka
Čistenie proteínov bez tagov 5 ~ 10 dní / dávka
QC podľa SDS-PAGE

Doplnkové služby (voliteľné)

Vývoj procesu fermentácie

Vývoj procesu čistenia proteínov bez značiek

Pilotné zväčšenie a výroba GMP

Analýza a testovanie

Čo robíme:

Pracovali sme na viac ako 300 upravených mikrobiálnych kmeňoch, vrátane E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115; PichiaPink kmeň1/2/3/4; a H. polymorpha.

Máme skúsenosti s periplazmatickou sekréciou E. coli, expresiou solubilných a inklúznych teliesok, ako aj s kvasinkovou intracelulárnou alebo sekrečnou expresiou.

Vytvárame vysokovýkonnú skríningovú platformu na skríning vysoko produkčných a stabilných kmeňov z viac ako sto kandidátskych kmeňov.

Získajte bezplatnú cenovú ponuku

Dostať do kontaktu