mRNA sa široko používa pri štúdiu funkcií génov alebo proteínov. Medzitým je to bežné pri vývoji profylaktických a terapeutických biologických látok. Ako bežná stratégia syntézy molekúl RNA nám in vitro transkripcia (IVT) umožňuje efektívne získať prispôsobené transkripty.
Spoločnosť Yaohai Bio-Pharma vytvorila súbor technológií syntézy mRNA na poskytovanie vysokokvalitnej RNA, ako je návrh a optimalizácia sekvencie, IVT, purifikácia, lyofilizácia a zapuzdrenie lipidových nanočastíc (LNP). Všetky produkty podliehajú prísnym normám kontroly kvality (QC).
S vypuknutím pandémie COVID-19 v roku 2020 pokročila technológia mRNA míľovými krokmi a jej súvisiaci výskum a aplikácie dosiahli bezprecedentný vývoj, vrátane profylaktických vakcín na prevenciu infekčných chorôb, terapeutických onkologických vakcín a liekov, nádorovej terapie, proteínov. substitučná terapia, regeneračná medicína a bunková a génová terapia (CGT).
mRNA vakcína | mRNA Therapeutics |
|
Proces | Voliteľná služba | Detaily služby | Dodacia lehota (pracovný deň) | dodanie |
Návrh a optimalizácia sekvencie mRNA | Návrh a optimalizácia kódovacích sekvencií | Návrh sekvencie CDS a optimalizácia kodónov | 1-3 | Sekvenčný súbor |
Návrh a optimalizácia nekódujúcich sekvencií | Návrh a optimalizácia UTR, polyA sekvencií | |||
Príprava plazmidu na transkripčnú šablónu | Príprava rekombinantného plazmidu | Syntéza génov | 7-10 | |
Amplifikácia a extrakcia plazmidu | 4 | |||
Linearizácia a čistenie plazmidu | ||||
mRNA in vitro transkripcia | Ko-transkripčné obmedzenie (jednokroková metóda) | In vitro transkripcia (IVT) / Cap analóg | 1-2 | N / A |
Nukleotidové modifikácie (UTP/CTP modifikácie) | ||||
Odstránenie templátu DNA (DNáza I) | ||||
Enzymatické zakrytie (dvojstupňový proces) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotidové modifikácie (UTP/CTP modifikácie) | ||||
Odstránenie templátu DNA (DNáza I) | ||||
čistenie mRNA (chlorid lítny/magnetické guľôčky) | ||||
Enzymatický uzáver | ||||
Purifikácia mRNA | Konvenčná schéma čistenia | Zrážanie chloridu lítneho | 1 | mRNA liečivá látka |
Čistenie magnetických guľôčok | ||||
Schéma čistenia chromatografickej kolóny | Kombinácia viacerých chromatografických metód | 1-2 | ||
Výmena vyrovnávacej pamäte | ultrafiltrácia | 1 | ||
Lyofilizácia mRNA | Lyofilizácia | Predmrazenie | 2-3 | mRNA lyofilizovaný prášok |
Primárne sušenie (sublimácia) | ||||
Sekundárne sušenie (desorpcia) | ||||
mRNAEnkapsulácia | zapuzdrenie LNP | zapuzdrenie LNP | 2-3 | mRNA-LNPDliekový produkt |
Koncentrácia a výmena pufra | ||||
Analýza kvality mRNA | mRNA liečivá látka/lyofilizovaný prášok | Koncentrácia, čistota | 1 | Protokol o skúške |
Integrita, efektivita zakrývania, polyA distribúcia chvosta | 2-5 | |||
mRNA-LNP liečivý produkt | Účinnosť zapuzdrenia | 1 | ||
Veľkosť a distribúcia častíc | ||||
Povrchový náboj | ||||
Validácia expresie mRNA | Hodnotenie buniek 293T | Pokovovanie buniek | 4 | |
Prechodná transfekcia buniek | ||||
Pozorovanie fluorescenčného signálu | 1-3 | |||
Western blot (WB)/Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) |
5' Čiapka | ▪ Bez uzáveru ▪ Cap0, co-capated ▪ Cap1, co-capated ▪ Cap1, enzymatický uzáver |
5' UTR/3' UTR | ▪ Prírodná sekvencia UTR ▪ Mutantná/skonštruovaná sekvencia UTR |
3' PolyA chvost | ▪ 100A ~120A chvost (odporúčané) ▪ Segmentovaný polyA chvost ▪ Iné vlastné chvosty |
Modifikované nukleozidy | ▪ Neupravené bázy ▪ Pseudouridín (Ψ) ▪ N1-metylpseudouridín (N1Ψ) ▪ 5-metylcytozín (m5C) ▪ 5-metyluridín (m5U) ▪ 5-metoxyuridín (5mU) ▪ 2-tiouridín (s2U) ▪ 2'-O-metyl-U ▪ Iné úpravy |
Integrovaný tok služieb
Poskytujte sériu služieb od návrhu front-end sekvencie až po prípravu mRNA na konci, kontrolu kvality a validáciu expresie.
Medzinárodný špičkový sekvenčný dizajn a optimalizácia
Profesionálny návrh a optimalizácia sekvencie mRNA uľahčujú efektívnu expresiu mRNA.
Diverzifikované modifikácie nukleotidov
Účinne zvyšovať expresiu mRNA a znižovať nepriaznivé imunitné reakcie mRNA.
Zrelá purifikačná platforma
Kombináciou konvenčnej a samostatne navrhnutej purifikačnej metódy sa získajú vzorky mRNA s vysokou čistotou
Kompletná platforma kontroly kvality
Obohaťte možnosti kontroly kvality tak, aby spĺňali požiadavky rutinných testov, ako je koncentrácia, čistota a integrita A260/280, ako aj požiadavky na kontrolu vysokej kvality, ako je účinnosť uzáveru/distribúcia polyA.
Fast Delivery
Prispôsobená mRNA môže byť doručená už za 7 dní, s výnimkou externej syntézy sekvencií.