Základom enkapsulácie je návrh a vývoj dodávacieho systému. Dobre navrhnutý systém dodávania umožňuje molekulám circRNA vstúpiť do tela bez toho, aby boli degradované enzýmami RNA a potom byť účinne dodané do cieľového miesta, preniknúť cez bunkovú membránu a byť uvoľnené intracelulárne.
Lipidové nanočastice (LNP) sú najlepším dostupným systémom dodávania s výhodami v enkapsulácii, expresii in vivo a bezpečnosti in vivo v porovnaní s inými systémami dodávania. LNP s fragmentmi nukleových kyselín sa ľahko prehĺtajú do buniek a tvoria vnútrobunkové telá. Po vstupe do bunky kyslé prostredie vnútrobunkového tela protónuje a pozitívne nabije hlavu ionizovaného lipidu, čím sa spojí s vnútornou membránou vnútrobunkového telesa a uvoľní cieľovú nukleovú kyselinu do bunky na pôsobenie.
Služba Yaohai Bio-Pharma circRNA sa naďalej zlepšuje a môže poskytovať službu enkapsulácie circRNA-LNP na optimalizáciu relevantných kritických parametrov procesu a zlepšenie konzistencie a reprodukovateľnosti výroby liekov circRNA.
Proces | Detaily služby | Dodacia lehota (deň) | dodávky |
zapuzdrenie circRNA-LNP | Predúprava materiálu a kvapaliny | 2 | circRNA-LNP liečivý produkt (DP) |
Miešanie mikrofluidných zariadení | |||
Tangenciálna prietoková filtrácia | 1 | ||
Sterilizačná filtrácia | |||
kontrola kvality circRNA-LNP | Účinnosť zapuzdrenia | 1 | Protokol o skúške |
Veľkosť častíc a index polydisperzity | |||
Zeta potenciál |
Rýchla syntéza, vysoká účinnosť výskumu a vývoja a vopred optimalizované riešenia;
Pomer zapuzdrenia môže dosiahnuť viac ako 90 %;
Veľkosť lipidových nanočastíc môže byť kontrolovaná zmenou rýchlosti vstrekovania tekutiny a pomeru;
Produkty circRNA-LNP sú validované in vitro bunkovou expresiou a môžu účinne exprimovať cieľový proteín.
Pripravia sa vzorky LNP-eGFP circRNA a ich rôzne dávky (1 ug, 2 ug a 4 ug) sa priamo transfekujú do buniek 293T, aby sa overilo, či môžu exprimovať cieľový proteín. Po 48 hodinách transfekcie je možné pozorovať jasný fluorescenčný signál a existuje efekt eskalácie dávky intenzity fluorescencie.
Lipo-circ_eGFP, tvorený lipozómom a nezapuzdrenou eGFP circRNA, sa berie ako kontrola.