Produkty získané in vitro cyklicizáciou a obohacením RNase R vyžadujú ďalšie odstránenie produktov in vitro transkripcie (IVT), vrátane nepoužitých substrátov v cyklicizácii, vedmocných produkov reakcie a poškodeného RNA.
Yaohai Bio-Pharma má zrelé riešenia na čistenie pomocou LiCl sedimentácie, magnetických kuličiek, samostatne vyvinuté metódy a ďalších rozmanitých čistiacich techník na účinné odstránenie rôznych nečistôt a prípravu vysoce čistého circRNA.
Čistiacia metóda pre malé množstvá circRNA pre bunkovú transfekciu a ako súčasť živočíšnych experimentov.
Čistiacia riešiteľnica na malé množstvá circRNA pre transfekciu buniek a ako súčasť experimentov s živočuchmi.
Aplikačné scénariá s vyššou kvalitou;
Stabilný a škálovateľný proces čistenia, ktorý spĺňa požiadavky GMP výroby.
Proces | Voliteľná služba | Podrobnosti služby | Dobový obdobie doručenia (Deň) | Výstupy |
čištěnie circRNA | Konvenčná čistiacia riešiteľnica | Precipitácia lithií chlóridom | 1 | cívná RNA látková forma |
Čistenie pomocou magnetických častíc | ||||
Veľmi čisté čištanie circRNA | Přípravná vysokoefektívna kapalinová chromatografia (HPLC) | 1-2 | ||
Výmena bufferu | Ultrafiltrácia | 1 | ||
kontrola kvality cívnej RNA | Koncentrácia⁄čistenie | Ultraviolettá (UV) spektrofotometria | 0.5 | Skúšobná správa |
Čistota | Elektroforeza v agárovom geľovi (AGE)/E-Gel | |||
HPLC - voliteľné | 1 |
Môžu sa dosiahnuť aplikabilné scenáre.
circRNA s čistotou viac ako 90%;
Ďakovi priebežnej kontrole RNase v experimentálnom prostredí a spotrebách sa účinne prevencia degradácie RNA.
Yaohai Bio-Pharma vyvinula zrelé riešenie na čistenie circRNA, ktoré môže účinne odstrániť rôzne procesné nečistoty.
Circular RNA produkty čištene konvenčným riešením sú stále očividne premiešané s prerušenou RNA a intronmi.
Po použití čistiacich riešení vyvinutých spoločnosťou Yaohai Bio-Pharma sa podarilo úspešne odstrániť rôzne lineárne RNA nečistoty, ako sú prerušené RNA a introny.
overenie exprésie circRNA
Pomocou konvenčnej liposómy sa purifikovaná eGFP circRNA transfekuje do buniek 293T a po 24 hodinách sa pozoruje fluorescenčný signál, ktorý sa po 48 hodinách ďalej zvyšuje. Fluorescenčný signál je stále detegovateľný na siedmy den a čtrnásty deň po transfekcii.