Produkty získané in vitro cyklizáciou a obohatením RNázy R vyžadujú ďalšie odstránenie z in vitro transkripcie (IVT), vrátane nespotrebovaných substrátov v cyklizačnej reakcii, vedľajších produktov reakcie a RNA.
Yaohai Bio-Pharma má vyzreté zrážanie LiCl, čistenie pomocou magnetických guľôčok, samovyvinuté čistenie a ďalšie diverzifikované čistiace riešenia na efektívne odstránenie rôznych nečistôt a prípravu vysoko čistej circRNA.
Purifikačný roztok pre malé množstvá circRNA na transfekciu buniek a ako súčasť pokusov na zvieratách.
Purifikačný roztok pre malé množstvá circRNA na transfekciu buniek a ako súčasť pokusov na zvieratách.
Aplikačné scenáre s vyššou kvalitou;
Stabilný a škálovateľný proces čistenia, ktorý spĺňa požiadavky na výrobu GMP.
Proces | Voliteľná služba | Detaily služby | Dodacia lehota (deň) | dodávky |
cirkRNA purifikácia | Konvenčný čistiaci roztok | Zrážanie chloridu lítneho | 1 | liečivá látka circRNA |
Čistenie magnetických guľôčok | ||||
Vysoko čistá purifikácia circRNA | Preparatívna vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC) | 1-2 | ||
Výmena vyrovnávacej pamäte | ultrafiltrácia | 1 | ||
kontrola kvality circRNA | Koncentrácia / čistenie | Ultrafialová (UV) spektrofotometria | 0.5 | Protokol o skúške |
Čistota | Elektroforéza na agarózovom géli (AGE)/E-gél | |||
HPLC - voliteľné | 1 |
Aplikačné scenáre možno dosiahnuť.
circRNA s čistotou viac ako 90 %;
Prostredníctvom prísnej kontroly RNáz v experimentálnom prostredí a spotrebných materiáloch sa účinne predchádza degradácii RNA.
Spoločnosť Yaohai Bio-Pharma vytvorila zrelý čistiaci roztok circRNA, ktorý dokáže účinne odstrániť rôzne nečistoty súvisiace s procesom.
Kruhové RNA produkty purifikované konvenčným roztokom sú stále zjavne zmiešané s RNA a intrónmi.
Po purifikačnom roztoku vyvinutom spoločnosťou Yaohai Bio-Pharma je možné úspešne odstrániť rôzne nečistoty lineárnej RNA, ako sú napríklad RNA a intróny.
Validácia expresie circRNA
Použitím konvenčného lipozómu sa purifikovaná eGFP circRNA transfekuje do buniek 293T a fluorescenčný signál sa pozoruje po 24 hodinách a pokračuje v zosilňovaní po 48 hodinách. Fluorescenčný signál možno ešte detegovať na 7. a 14. deň po transfekcii.