Дисульфидные связи иногда называют SS-связями или дисульфидными мостиками. Дисульфидные мостики влияют на биологическую активность биологических препаратов, таких как пептиды, белки и антитела.
Yaohai Bio-Pharma предлагает услуги по анализу дисульфидных связей, в основном на основе жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС).
Мы принимали участие в структурной характеристике белков различных крупных молекул, включая рекомбинантные субъединичные вакцины, нанотела/VHH/однодоменные антитела (sdAbs), фрагменты антител, гормоны/пептиды, цитокины, факторы роста (GF), ферменты, коллагены, и т. д.
Нормативные требования к дисульфидным облигациям
В разных биологических препаратах существует разное количество и форма дисульфидных мостиков, что следует полностью оценить в ходе исследований по характеристике белка, если ожидаемая первичная аминокислотная последовательность продукта содержит аминокислоту цистеин. Этого также требует нормативный документ ICH Topic Q6B.
Аналитические методы
| Анализ |
методы |
| Дисульфидные связи |
Жидкостная хроматография-масс-спектрометрия (ЖХ-МС) после расщепления |
Для получения необходимых данных для полной оценки дисульфидных мостиков и свободных тиолов ученые из Yaohai Bio-pharma проводят пептидное картирование после переваривания с помощью специфической протеазы. После этого проанализируйте с использованием онлайновой масс-спектрометрии ЖХ/Ионизации электрораспылением (ES-MS) и/или ЖХ/ES-MS/MS до и после восстановления.
Yaohai Bio-pharma также может провести тест Эллмана, который является важной частью оценки любого продукта, полностью содержащего цистеин. В рамках теста Эллмана мы проводим дериватизацию сульфгидрилов с использованием (5,5'-дитио-бис-[2-нитробензойной кислоты]). Для определения уровней свободных тиолов полученный продукт анализируют УФ-спектрофотометрией при 412 нм.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕТ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
